留进入RISC复合体成为向导链，有人将这一现象称为“不对称原理（asymmetryrule）”。Ago2在RNAs沉默途径中的“脱靶”效应：在RNAs沉默途径中，Ago2因其没有序列特异性，可与各种不同序列小RNAs结合，形成RISC。为确保Ago2与小RNAs精确结合而不是降
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解这些效应分子，导致“脱靶”效应。这条沉默途径还需要1个特定的结构构成监视系统，这种监视系统可能是小RNAs的5′末端突出的2个碱基恰好插入Ago2的PAZ结构域的口袋状结构2。另外，小RNAs与RISC结合诱导靶mRNA降解，需要小RNAs的5′端磷酸化结构与Ago2的Mid结构域锚定9。Ago2在装配中的筛选和修饰作用：人体内Dicer只发现1种，而人的miRNA已报道1800多种（miRBase），外源性siRNA种类更多。尽管Dicer含有多种功能的结构域，但对众多的siRNAmiRNA结合与切割是否存在筛选，未见报道。人类Ago亚族有4种蛋白即hAgo1～4，目前只发现Ago2具有核酸内切酶活性，Dicer募集哪一种Ago组装RISC，其筛选机制、有报道认为可能与靶mRNA碱基互补精确度及互补链末端结构相关10。miRNA的5′端的2～7个碱基是miRNA识别的关键，siRNA的5′端的磷酸化是siRNA识别关键。Filipowicz11认为当miRNA的碱基配对核心区与靶mRNA形成完全互补双链时，这种双链可形成A型螺旋与Ago2的DDH氨基酸结构区结合，miRNA可以对转录体切割降解，当不完全配对影响A型螺旋的形成时则表现出对转录体翻译抑制。Ago2具有的核酸内切酶活性还可以对靶mRNA碱基错配或环状突起碱基异常结构进行切割修饰。Ago2在RNAs沉默途径中的抑制蛋白合成机制：Ago2在与miRNAs结合形成RISC后，靶向mRNA进入胞质处理小体（pbodies），进而通过3种方式抑制蛋白质合成：①诱导mRNA脱腺苷酸化和脱帽，启动mRNA降解；②通过Ago2和翻译起始因子竞争与mRNAM7G帽子的结合，阻碍功能性核糖体的装配，造成翻译起始抑制；③通过募集多肽链降解（翻译延伸）相关的细胞因子（肽酶、翻译后修饰酶）使核糖体脱离肽链或新合成的肽链迅速降解，这一过程发生在翻译起始后12。免疫荧光定位证明，Ago2大多定位于细胞质中，并在P小体中富集，参与上述的转录后水平的基因沉默。但仍有一小部分Ago2定位于细胞核中，它们作用于DNA启动子区域，使靶基因和组蛋白甲基化，从而抑制基因表达。最近发现Ago2介导的miRNA在无血清细胞的AU富集区域，可以增强转录本的翻译。有人估计，在人类基因组中大于30的基因的表达都受与Ago相关的RNAi现象的调控13。探索Ago2在人类细r