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是siRNA的结合位点。Mid结构域与小RNAs的5′端磷酸结构结合将小RNAs与Ago蛋白锚定（或啮合）。Mid结构域中还含有1个高度保守的motif结构，其与elf4E（eukaryotictra
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factor4E）的7甲基鸟嘌呤（m7G）帽结构相似。正是这个类似m7G帽结构阻止人Ago2与elf4E的结合，从而对靶mRNA的转录起始起到阻遏作用。Piwi结构域是1种属于RNaseⅢ家族结构域，均含有螺旋包围的5个片层结构，Piwi与RNaseⅢ一样催化切割siRNA与RNA形成的dsRNA中的单链RNA，因而具有核酸内切酶的活性1，切割产物具有3′OH和5′磷酸结构，Piwi结构域中的Piwibox区（盒）可以直接与Dicer酶结合2。Liu等5在293T细胞中证明Ago14都能与siRNA结合，但只有Ago2具有“切割”活性，在小鼠中敲除Ago2基因出现一些异常的发育从而导致胚胎死亡。进一步研究发现人类Ago2“切割”（即核酸内切酶）活性中心由Asp597、Asp669、和His8073个氨基酸组成，若Ago2的D669位点突变，Ago2功能丧失6。2Ago2的装配研究Ago2具有抑制蛋白质翻译和促进miRNA、piRNAs生物合成和成熟的miRNA表达的功能，Ago2是RISC的核心成分，与miRNA与siRNA结合构成RISC通过碱基互补原理与靶miRNA完全或不完全互补结合产生效应的。Ago2的装配过程也就是RISC的形成过程，可分为起始阶段和效应阶段。21起始阶段主要是内源性或外源性长链RNA（dsRNA）在Ago2介导下生物合成成熟的miRNA、siRNA或piRNA的过程。首先DNA重复序列编码长链miRNA，由Diosha对细胞核里miRNA前体进行剪切，核膜蛋白主动运输于细胞质中，再被Dicer酶剪切掉茎环部成为成熟的长约18～24核苷酸的双链miRNA。Dicer酶还能对外源性dsRNA分子加工成小的双链siRNA3。22效应阶段与以往观点不同最新研究认为，目前认为双链RNA（dsRNA）在Ago2介导下结合RISC并生成2条单链（即正义链和反义链）是不依赖ATP的7，其中反义链与Ago2的PAZ结构域结合，形成Ago2的核糖核蛋白（RNP）复合体。siRNA与靶mRNA序列之间是完全或接近完全互补的。Ago2介导对转录本剪切在距离单链siRNA5′10
t的位点进行。miRNA与靶mRNA5′端UTR位点不完全互补产生翻译抑制，其反应关键特征是：miRNA和靶mRNA之间存在序列错配4。RISC在形成过程中还需要其他蛋白的参与，如TRBP和PACT。23Ago2装配过程几个关键问题的探讨Ago2装配中的dsRNA“不对称”的选择：RISCAgo2是如何判定降解dsRNA正义链的？Khvorova等8分析了siRNA链两端的热动力学稳定性，发现反义链5′端的热力学稳定性差，因而被保r