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创作时间:二零二一年六月三十日
琼脂扩散试验之邯郸勺丸创作
创作时间:二零二一年六月三十日
利用可溶性抗原与抗体在半固体琼脂内进行扩散若抗原与抗体对应而且比例适当就会呈现白色沉淀线此为阳性反应琼脂扩散试验可在试管内、平皿中以及玻片上的琼脂中进行又可分为单向琼脂扩散试验和双向琼脂扩散试验两类
单向琼脂扩散试验是一种经常使用的定量检测抗原的方法将适量抗体与琼脂混匀浇注成板凝固后在板上打孔孔中加入抗原抗原就会向孔的四周扩散边扩散边与琼脂中的抗体结合一按时间后在两者比例适当处形成白色沉淀环沉淀环的直径与抗原的浓度成正比如事先用分歧浓度的标准抗原制成标准曲线则从曲线中可求出标本中抗原的含量本试验主要用于检测标本中各种免疫球卵白和血清中各种补体成份的含量敏感性很高
双向琼脂扩散试验是将半固体琼脂倾注于平皿内或玻片上待其凝固后在琼脂板上打孔将抗原、抗体分别注入小孔内使两者相互扩散如果抗原、抗体相互对应浓度、比例适当则一按时间后在抗原、抗体孔之间呈现清晰可见的沉淀线双向琼脂扩散法可用来分析溶液中的多种抗原一对立原、抗体系统只能形成一条沉淀线分歧的抗原抗体系统在琼脂中扩散的速度分歧可在琼脂中形成份歧的沉淀线本法主要是用于检测血清中各种免疫球卵白、甲胎卵白、乙肝概况抗原等缺点是需要时间过长灵敏度不高
琼脂免疫扩散试验
资料与试剂
1.琼脂粉
2.平皿
3.打孔器
4.生理盐水或其他缓冲液可加1万的硫柳汞或叠氮钠防腐
把持方法
1.称取一定量的琼脂粉按1左右(%~15)的比例加
入生理盐水或缓冲液水浴煮沸融化20mi
2.将融化的琼脂倒入平皿内使厚度2mm~3mm自然冷却
创作时间:二零二一年六月三十日
f创作时间:二零二一年六月三十日
3.根据要求(孔径即孔的直径孔距即两孔圆心之间的距离包括两孔的半径)按模板打孔也可直接用组合打孔器打孔现在一般多打成梅花形孔图
4.挑出孔内琼脂注意不要挑破孔缘5.在火焰上缓缓加热使孔底边缘的琼脂少许熔化以封底
以免加样后液体从孔底渗漏6.以毛细滴管吸取样品加入孔内注意不要发生气泡以加
满为度加少了影响反应水平加多了易溢出也影响反应结果
7.加毕后盖上平皿盖将平皿翻过来置湿盘中37℃自由扩散24h~48h结果判定
1.用以检测抗原或比力抗原不同时将抗血清置中心孔将待测抗原或需比力的抗原置于周围相邻孔若呈现沉淀带完全融合证明为同种抗r
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