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美国贝克曼集团有限公司)、MK3酶标仪(美国Thermo)、流式细胞仪(美国BD公司)。总胆固醇(CHOL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、尿酸(UA)试剂盒、葡萄糖(GLU)测定试剂盒,试剂盒购自上海罗氏血清IL17、CRPELISA试剂盒购自武汉基因美公司I
tracellularFixatio
Permeabilizatio
BufferSet、抗人CD4FITC抗体、抗鼠CD4FITC抗体、抗人IL17APE抗体、抗鼠IL17APE抗体购自美国eBioscie
ce公司。
15方法①采用全自动生化分析仪P800检测标本中CHOL、HDLC、LDLC、UA、GLU表达水平,按试剂盒说明书设定各项指标参数②FCM检测外周血中TH17细胞频率,将待检血清50μl及Th17抗体15μl加入流式管内混匀后避光条件下孵育20mi
,随后加入500μl溶血素继续孵育10mi
,再加入500μlPBS混匀,2000rpm离心5mi
,弃上清,用300μlPBS重悬细胞,上机检测Th17细胞百分比③细胞因子IL17、CRP检测:取待测标本血清,采用双抗体夹心法参照相应试剂盒说明书操作,使用MK3酶标仪在450
m下测定吸光度(OD值),并通过标准曲线计算样品中IL17、CRP浓度。
16统计学分析应用Prism50软件进行统计分析,计量资料采用(x±s)表示,两两比较采用t检验,多组数据比较采用F检验,P
2结果
与对照组比较,各组Th17细胞的频率表达均升高,差异具有统计学意义(P
3讨论
冠心病是一种血管冠状动脉粥样硬化病变导致的血管管腔狭窄继而引起心肌缺血坏死诱发的心脏疾病。该病以严重的胸痛、心律失常、心衰为典型临床特征6。依据心电图ST段抬高分为两大类7,该病目前起病急,因此寻找更快更合的血清学指标,及时给予干预治疗,具有重要意义。近年来,不少学者提出炎症学说,炎症在动脉粥样硬化的所有阶段起着关键作用8,9。
Th细胞协调免疫应答的主要手段之一是产生细胞因子。现已明确定义10的有分泌的Th1细胞亚群、Th2细胞亚群,最新研究发现Th17作为一种新型T细胞分子,与炎症性疾病,过敏性疾病有重要关系。IL17主要来自于Th17的分泌,其不光能够分泌IL6、IL8,还能水解
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蛋白酶,另一方面也能募集中性粒细胞,一定程度上参与炎症过程11。外周血中高水平的IL17在急性冠脉综合征患者表达,这也就说明IL17在冠脉硬化性疾病中有着重要作用。本次研究显示,与对照组比较,各组TH17及IL17表达水平差异均有统计学意义(P
CRP是由肝脏合成的一种急性时相反应蛋白,主要作用于淋巴细胞膜表面受体,促进淋巴细胞增生,进一步抑制T淋巴细胞增生分r
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