异常峰分析
异常的色谱峰指的是色谱图中的无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。异常峰是色谱实验工作中最棘手的问题。这些峰严重影响色谱分析的结果。色谱图中不可能有纯正的高斯对称峰轻微的拖尾是正常的这是由分离系统所决定的。在此仅对几种异常峰进行分析。
1峰前或峰后有小峰的分析
产生原因大致分为以下几种情形
1样品不纯。可改变不同的流动相和色谱柱对样品进行分离比较选择合适的分离条件。
2分析柱或保护柱柱头塌陷。此情况较常见可更换分析柱或保护柱后对峰形进行比较。柱头塌陷时往往所有的峰都会出现峰分裂。对色谱柱再生和清洗可以改善分离效果。
f3色谱柱柱容量下降。当长时间使用后有一些强保留组分吸附在柱子中不大的进样量往往就会出现峰分裂。用强洗脱能力的溶剂清洗色谱柱或更换色谱柱可使问题得到改善。
4样品溶剂与流动相不匹配或进样体积过大。当样品溶剂比流动相极性大时有时即使进样体积很小也容易出现峰变形和裂分现象。建议用流动相溶解样品。
5流动相不恰当。此情况较罕见有些样品在特定的色谱条件下可能存在结构的动态平衡而出双峰这种双峰是无法分离完全的改变色谱条件尤其是pH值会使峰形正常。
6样品分解。不稳定的样品在色谱分离过程中变成其他物质而出现双峰。这时需改变样品处理方法或色谱分离条件。
2负峰分析
在色谱分析中有时会出现负峰或倒峰如图3中的大峰的左下就有一负峰。出现这种现象可能是由以下几种原因引起的可针对不同情况进行排除进而使问题得到解决。
1流动相吸收本底值过高。此时可适当改变检测波长。
2进样过程中进入空气。进行排气处理直到基线平稳再进样。
3样品组分的吸收低于流动相。可改变流动相或改变检测波长。
4配制样品的溶液与流动相不一样。重新配制样品用与流动相一样的溶剂配制或稀释样品。
3前沿、拖尾峰分析
拖尾：1干扰峰，优化条件分离；2色谱柱塌陷，更换色谱柱；3流动相pH不合适，调节pH值；4管路没有接好，存在较大的死体积，可以重新接一下。
前沿：1溶剂选择不合适，选择合适的溶剂；2样品过载，降低进样量；3柱温太低，升高柱温；4色谱柱损坏，更换色谱柱；
图谱前沿和拖尾的原因主要是流动相选择不合适，可以相应调整流动相的极性，或者适当加入酸来调整，可以得到较好的改善。一般来讲，酸碱在流动相中对于前沿和拖尾影响较大。柱前沿是可能因为柱超载，拖尾是可能因为样品被r