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。左右的小块。
接种到培养基上,用锡箔纸封盖瓶口,并用橡皮筋扎紧。然后,在
培养瓶上贴上标签,写明材料名称、接种日期和小组号。⑤.将接种后的胡萝卜组织块,放在恒温避光条件下培养。4d后,检查培养
材料的污染情况;14d后,观察愈伤组织的生长状况。然后,在恒温箱中继续避光培养。在培养过程中,注意定期观察和记录愈伤组织的生长情况。⑥.培养一段时间后,将生长良好的转接到分化培养基上,培养一段时间后,
f胡萝卜的愈伤组织就可以诱导出成3、注意事项⑴.外植体的选择与制备。
。然后将试管苗移栽到大田,培养
①选择外植体时,由于外植体的脱分化难易因植物种类、器官来源及生理状况的不同而有很大差异,因此,选择哪些作为外植体应该注意。一般来讲,烟草、胡萝卜,植物的花和幼嫩的组织脱分化相对较易,而植物的茎、叶和成熟的老组织则较难。②制备外植体首先要消毒,其次要选取有形成层的部分,因形成层细胞易脱分化。⑵.植物组织培养注意的要点①培养基包括所有操作工具都应进行消毒和灭菌,谨防杂菌污染。②需在无菌条件下操作。③接种,继代培养的转移都应在接种箱内进行。⑶.对于植物组织培养来说,光照条件非常重要,包括光照强度、时间和波长。但在由高度分化的组织形成愈伤组织的诱导阶段往往要暗培养,而在分化形成试管苗的再生的过程中一定要有光照。诱导形成愈伤组织阶段的暗培养有利于细胞的脱分化产生愈伤组织,如果在光照条件下容易分化产生维管等组织,不利于产生大量的愈伤组织。由愈伤组织经细胞有丝分裂和分化形成试管苗的过程中需要光照,原因是叶中叶绿素的合成需要光照条件。(五)、植物体细胞杂交技术1.概念:不同种植物的把杂种细胞培育成新的2.过程,在一定条件下融合成的技术。,并
纤维素酶不同细胞原生质体人工诱导原生质体融合离体的细胞果胶酶
→杂种细胞→杂种植株。3.植物体细胞杂交步骤:1去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体,目前最常用的去细胞壁的方法是酶解法,也就是在温和条件下用纤维素酶、果胶酶去除植物细胞的细胞壁。2不同植物体细胞原生质体融合,必须通过物理法和化学法来诱导融合。物理方法有:离心、振动、电激等促使原生质体融合。化学法是用聚乙二醇PEG作为诱导剂来诱导融合。融合后再生出细胞壁。
f3用植物组织培养方法进行培育,可得到杂种植株。如图
在此过程中需要注意的问题有:①植物体细胞杂交过程中,r
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