高效液相色谱法
高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入的供试品，由流动相带入柱内，各成分在柱内被分离，并依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。
1对仪器的一般要求和色谱条件高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。色谱柱的内径一般为39～46mm，填充剂粒径为3～10um。超高效液相色谱仪是适应小粒径（约2um）填充剂的耐超高压、小进样器、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。
（1）色谱柱反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂而成的色谱柱。常见的载
体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等；常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反向色谱。
手性分离色谱柱：用手性填充剂填充而成的色谱柱。色谱柱的内径与长度，填充剂的性状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残留量，填充的致密与均匀程度等均影响色谱柱的性能，应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。温度影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。为改善分离效果可适当提高色谱柱的温度，但一般不超过60℃。残余硅羟基未封闭的硅胶色谱柱，流动相的pH值一般应在2～8之间。残余硅羟基已封闭的硅胶、聚合物复合硅胶或聚合物色谱柱可耐受更广泛pH值得
f检验操作规程
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流动相，适合于pH值小于2或大于8的流动相。
（2）检测器最常用的检测器为紫外可见分光检测器，包括二极管阵列检
测器，其他常见的检测器有荧光检测器、蒸发光散射检测器、示差折光检测器、
电化学检测器和质谱检测器等。
紫外可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器为选择性检测器，其响
应值不仅与被测物质的量有关，还与其结构有关；蒸发光散射检测器和示差折
光检测器为通用检测器，对所有物质均有响应，结构相似的物质在蒸发光散射
检测器的响应值几乎仅与被测物质的量有关。
紫外可见分光检测器、荧光检测器、电化学检测器和示差折光检测器的响
应值与被测物质的量在一定范围内呈线性关系，但蒸发光散射检测器的响应值
与被测物质的量通常呈指数关系，一般需经过对数转换。
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