实验二
分离以尿素为氮源的微生物
1有一些细菌含有脲酶，它们可以通过降解尿素作为其生长的氮源。利用以尿素作为唯一氮源的培养基即可分离出此类微生物。2．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。3．以尿素为氮源的微生物能分解尿素产生氨，氨为碱性，酚红指示剂在碱性下为红色，红色区域大小代表脲酶活性强弱和含量的多少。
1．尿素又称脲，是蛋白质降解的产物。在人和其他哺乳动物如家畜的尿中都含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。2．以尿素为氮源的微生物的特点含有脲酶，通过降解尿素作为其生长的氮源。其利用尿素的反应式为：NH22C＝O＋H2O脲酶2NH3＋CO2。3．分离以尿素为氮源的微生物1实验原理：①在以尿素为唯一氮源的选择培养基上生存的微生物能以尿素为氮源。②细菌合成的脲酶能将尿素分解成NH3，致使pH升高，使酚红指示剂变红。2培养基的对照：制备LB全营养培养基和尿素为唯一氮源的培养基，分别培养土壤中的微生物，并对菌落观察并计数。3实验步骤：
1．分离以尿素为氮源的微生物所采用的分离方法是
fA．涂布分离法
B．划线分离法
C．稀释分离法
D．选择分离法
解析：选A微生物的分离方法多种多样，本实验使用了涂布分离法。
2．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比
A．比实际值高
B．比实际值低
C．和实际值一致
D．比实际值可能高也可能低
解析：选B培养基上的一个菌落也可能由相连的两个或多个菌体繁殖而来，并且该
方法测得的是活菌的菌落数目，未包括死菌数，因此统计的活菌数要少于菌体实际值。
3．下列有关叙述，错误的是
A．在尿素固体培养基上培养含有脲酶的微生物会导致培养基呈酸性
B．地表土壤中含有一定量的脲
C．以尿素为氮源的细菌含有脲酶
D．脲是一种有机化合物，含有氮元素
解析：选A根据反应式：NH22C＝O＋H2O—脲—酶→2NH3＋CO2，在尿素固体培养基上培养含有脲酶的微生物会产生NH3，从而导致培养基呈碱性。
4．用以尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基，培养尿素分解菌后，指示剂将
A．变蓝色
B．变红色
C．变黑色
D．变棕色
解析：选B尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，会使培养基的碱性增强，pH
升高，加入酚红指示剂将变红色。
5．在细菌分解尿素的化学反应中，生成物中除CO2外还有A．N2B．NO－2C．NO－3D．NH3解析：选D以尿素为氮源的微生物中含有脲酶，它能降解尿素并产生NHr