(一)、某培养基的配方是MS+BA15mgL+NAA25mgL+IBA10mgL25蔗糖+
07%琼脂粉。MS母液的浓度分别是:大量元素50倍,微量元素100倍,铁盐20倍,有机
物100倍;BA母液浓度10mgml,NAA母液浓度05mgml,IBA母液浓度02mgml。
要配制800ml该培养基,需要吸取各种母液各多少ml?分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克?
(要求写出计算步骤)1BA0815112ml
2NAA0825054ml
3IBA081024ml4蔗糖8002520g5琼脂粉8000756g
(二)、如何减轻试管苗玻璃化现象?如何防止外植体的真菌污染?
1(1)利用固体培养方法,增加琼脂浓度,降低培养基中的渗透势,造成细胞吸水阻遏。
或提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂,减少培养基中植物材料可获得的水分,这也可以抑
制玻璃化的发生。
(2)适当降低培养基中的细胞分裂素和赤霉素的浓度。或者,适当增加培养基中Ca、Mg、M
、K、P、Fe、Cu、Z
元素含量,降低N和CL元素比例,特别是降低胺态氮的浓度,提高硝态氮量。
(3)增加自然光照。因为自然光中的紫外线能促进试管苗成熟。(4)改善培养器皿的气体交换状态封口膜
(5)在培养基中添加其他物质。如添加马铃薯汁可降低油菜的玻璃苗的产生频率。2在接种前要求无菌室内做到用空气循环过滤装置使空气过滤灭菌或通过紫外线照射灭菌
外,再利用超净工作台接种前,应开机15mi
以达到空气的充分过滤灭菌。而且接种时严格操作,如在接种前去掉橡皮筋,打开棉塞时动作要轻及去掉瓶塞后瓶子应拿成斜角,最好
瓶口放在酒精火焰的前方等等
(三)、简答出一般茎段是怎样选材消毒和接种的?
选材:较幼嫩的材料,器官的生理状态和发肓年龄,外植体的大小为05-10cm消毒:自来水较长时间冲洗70酒精浸泡植物种无菌水冲洗23次210NaClO(01HgCl2)12mi
无菌水冲洗3次。(第三章5页)接种:①左手拿三角瓶或果酱瓶,用右手轻轻取下封口膜或盖子
②将三角瓶或果酱瓶的口靠近酒精灯火焰,瓶口稍微倾斜,这样瓶口外部在火焰上旋转灼烧
数秒钟,后用镊子将外植体送入瓶中。
一.植物组织培养成功的关键是什么?
1无毒无菌的环境2生长素或生长素类似物3通常用固体培养基琼脂4先进行植物组织或器官的脱分化5长出根来后要保证根呼吸所需氧气
二.植物外植体的表面消毒剂种类
1、漂白粉(110的滤液)2、次氯酸钠溶液(0510)3、氯化汞(011)4、酒精(7075)5、过氧化氢(310)6、新洁尔灭等。三.植物组织培养技术的常见难题及防治方法。1污染问题:分为细菌r