，静置1mi
后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。r
操作步骤r
1从室温平衡20mi
后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。r
2设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；r
3样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。r
4除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60mi
。r
5弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1mi
，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次也可用洗板机洗板。r
6每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15mi
。r
7每孔加入终止液50μL，15mi
内，在450
m波长处测定各孔的OD值。r
结果判断绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。r
试剂盒性能r
1准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于09900。r
2灵敏度：最低检测浓度小于10pgmL。r
3特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。r
4重复性：板内、板间变异系数均小于15。r
5贮藏：28℃，避光防潮保存。r
6有效期：6个月r