人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子GMCSFELISA试剂盒r
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人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子GMCSFELISA检测试剂盒使用说明书r
人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子GMCSFELISA试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断r
检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验ELISA。往预先包被粒细胞巨噬细胞集落刺激因子GMCSF抗体的包被微孔中，r
依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子GMCSF呈正相关。用酶标仪在450
m波长下测定吸光度OD值，计算样品浓度。r
样品收集、处理及保存方法r
1血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。r
2血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。r
3细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。r
4组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。r
5保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。r
自备物品r
1酶标仪450
mr
2高精度加样器及枪头：0510uL、220uL、20200uL、2001000uLr
337℃恒温箱r
操作注意事项r
1试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。r
2实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封低温干燥保存。r
3浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。r
4严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。r
5所有液体组分使用前充分摇匀。r
试剂盒组成r
名称96孔配置48孔配置备注r
微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无r
标准品03mL6管03mL6管无r
样本稀释液6mL3mL无r
检测抗体HRP10mL5mL无r
20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释r
底物A6mL3mL无r
底物B6mL3mL无r
终止液6mL3mL无r
封板膜2张2张无r
说明书1份1份无r
自封袋1个1个无r
注：标准品S0S5浓度依次为：0、30、60、120、240、480pgmL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。r
洗板方法r
1自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1mi
，洗板5次。r
2手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液r