全球旧事资料 分类
:在检出的30份以上阳性样品中,经气相色谱法验证,阳性结果的符合率应在80以上。3、葱、蒜、萝卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性,处理样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提或采用表面测定法。对一些含叶绿素较高的蔬菜,也可采取整株(体)蔬菜浸提法,减少色素的干扰。4、当温度条件低于37℃,酶反应速度随之放慢,药片加液后放置反应的时间也应相对延长,延长时间的确定,应以空白对照卡用手指(体温)捏3mi
时可以变蓝,即可往下操作。注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。空白对照卡不变色的原因:一是药片表面缓冲溶液加得少、预反应后的药片表面不够湿润;二是温度太低。5、红色药片与白色药片叠合反应的时间以3mi
为准,3mi
后的蓝色会逐渐加深,24h后
f颜色回逐渐退去。
方法二酶抑制率法(分光光度法)
一、目的要求:学习酶抑制率法测定果蔬有机磷和氨基甲酸脂类农药残留的原理和方法,注意实验过程的操作要点。二、实验原理:根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性原理,向蔬菜的提取液中加入生化反应底物碘化乙酰硫代胆碱和乙酰胆碱酯酶,如果蔬菜不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量低,酶的活性就不被抑制,实验中加入的底物就能被酶水解,水解产物与加入的显色剂反应产生黄色物质。如果蔬菜的提取液含有农药并残留量较高时,酶的活性被抑制,底物就不被水解,当加入显色剂时就不显色或颜色变化很小。用分光光度计在412
m处或农药残毒快速检测仪测定吸光值,根据计算出的抑制率,就可以判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留量的情况。三、实验试剂和仪器:(一)试剂1、pH80缓冲液分别称取119g无水磷酸氢二钾与32g磷酸二氢钾,溶解于1000mL蒸馏水中。2、乙酰胆碱酯酶(实验专用酶)根据酶活力用缓冲溶液溶解,3mi
的吸光值变化ΔA0值应控制在03以上。摇匀后在05℃冰箱中保存,保存期不超过4天。3、底物碘化乙酰硫代胆碱称取250mg碘化乙酰硫代胆碱,用30mL缓冲溶液溶解,在05℃下保存。保存期不超过2周。4、显色剂分别称取160mg二硫代二硝基苯甲酸和156mg碳酸氢钠,用20mL缓冲溶液溶解,4℃冰箱保存。5、可选用由以上试剂配置的试剂盒。乙酰胆碱酯酶的ΔA0值应控制在03以上。(二)仪器1、分光光度计或相应的农残快速检测仪;2、天平(001g);3、恒温水浴或恒温培养箱。
f四、实验步骤r
好听全球资料 返回顶部