第一部分
专题十一
一
一、选择题1．图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，
eo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是
A．图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，含有4个游离的磷酸基团B．在构建重组质粒时，可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNAC．用PstⅠ和Hi
dⅢ酶切，加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长答案C解析图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，会破坏两个磷酸二酯键，磷酸二酯
键是由相邻脱氧核苷酸的磷酸基团和脱氧核糖脱水形成的，因此只含有2个游离的磷酸基团；由于BamHⅠ的切割位点在目的基因的内部，使用它切割外源DNA会破坏目的基因；用PstⅠ和Hi
dⅢ切割质粒后，虽然破坏了ampr基因，但是会保留下
eo基因作为标记基因，以备筛选。用PstⅠ和Hi
dⅢ切割外源DNA后，可得到两个能与质粒连接的DNA片段，但是只有带目的基因的DNA片段与酶切后的质粒连接才符合要求；由于氨苄青霉素抗性基因遭到破坏，因此，只能用含新霉素的培养基进行筛选。2多选2014江苏，23下列关于基因工程技术的叙述，错误的是A．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列B．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达答案ABC
f解析
本题考查基因工程的相关知识。不同的限制性核酸内切酶特异性地识
别核苷酸序列不同，A错误；酶具有专一性，PCR反应中温度的周期性改变是为了不同的酶将DNA解旋、扩增，B错误；载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，C错误；基因成功插入也未必会表达，D正确。解答此类题目一定要准确把握基因工程的步骤、基因工程的工具。3．我国科学工作者培育的转基因抗虫棉，其抗虫基因来源于A．苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因B．棉铃虫变异形成的致死基因C．寄生在棉铃虫体内的线虫基因D．普通棉的突变基因答案解析A用于植物抗虫基因工程研究的基因很多，但并不是所有的基因均可用
于转基因抗虫棉的培育，而应根据棉花自身受害虫的危害情况，有针对性地选择那些对棉花害虫具有较强杀伤作用的基因。随着科学的发展，人们从苏云金芽孢杆菌中分离出的Bt基因能控制合成不同结构特性的伴胞晶体毒素蛋白，从而具备对不同种类害虫的杀伤能力，A正确，B、C、D错r