取液B剂
5mL管
2
GuSCN、TrisHCL、EDTA、
Trito
100
DEPCH2O
3ml瓶
1
DEPC
HCV内标溶液
PCR扩增试
剂
HCV反应液A
100μL管
1
含内标片段的病毒样颗粒及稳
定剂
270μL管
1
引物、探针、Tris盐酸Buffer
HCV反应液B
30μL管
1
Taq酶、逆转录酶、RNasi

阴性质控品
200μL管
1
阴性血浆
质控品
HCV强阳性质控200μL管品
1
HCV阳性血浆
P3
f丙型肝炎病毒（HCV）核酸定量检测标准操作规程（PCR荧光探针法）
HCV临界阳性质200μL管控品
1
HCV阳性血浆
5524试剂保存和有效期：保存于20±5℃；有效期9个月。5526配套提取试剂盒组成：
组分名称
规格
数量
离心柱
20个包
1
收集管
80个包
1
裂解液
44ml瓶
1
抑制物去除液（浓缩液）7ml瓶
1
去离子液（浓缩液）
44ml瓶
1
洗脱液
3ml瓶
1
蛋白酶K（干粉）
22mg瓶
1
CarrierRNA（干粉）
155ug管
1
5527自备试剂：无水乙醇56操作过程：待测样本、阳性质控品、阴性质控品同步处理。
P4
f561实验前准备：
丙型肝炎病毒（HCV）核酸定量检测标准操作规程（PCR荧光探针法）
5611抑制物去除液（浓缩液）中加入43ml的无水乙醇，并在管盖及管壁上打勾。室温保存。
5612去离子液（浓缩液）中加入176ml的无水乙醇，并在管盖及管壁上打勾。室温保存。
5613蛋白酶K（干粉）中加入11ml的洗脱液，充分混匀，溶解。20℃保存。
5614CarrierRNA（干粉）中加入110ul的洗脱液或内标溶液（PCR试剂盒中成分），充分混匀，溶解。20℃保存。
5615配制CarrierRNA裂解工作液（现配现用）
1人份
20人份
裂解液
200ul
4ml
CarrierRNA4ul
80ul
562RNA提取：5621在15ml的无菌离心管中加入50ul的蛋白酶K；5622取200ul样本加入离心管中；5623再加入200ul的裂解工作液（即已含CarrierRNA的裂解液），盖紧管盖，漩涡震荡15秒以充分混匀，高速离心10秒（防止温育是产生气泡），72℃10分钟；同时将洗脱液置于72℃预热。5624加入250ul无水乙醇，盖紧管盖。漩涡震荡15秒。
P5
f丙型肝炎病毒（HCV）核酸定量检测标准操作规程（PCR荧光探针法）
5625将混合液全部吸至离心柱，室温下12000g离心1分钟，将离心柱转至新的收集管；
5626将500ul的抑制物去除液加入离心柱，室温下12000g离心1分钟，将离心柱转至新的收集管；
5627将500ul的去离子液加入离心柱，室温下12000g离心1分钟，将离心柱转至新的收集管；
5628重复上一步操作一次；5629将离心柱收集管于室温下14000g离心3分钟以除去残留的乙醇；56210将离心柱取出，放入新的15ml离心管。打开离心柱盖子，72℃放置2分钟使用干式恒温器，不r