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三花龙胆中不同部位龙胆苦苷的含量测定
作者:刘晓巍姚丽娜高鹏来源:《中小企业管理与科技学术版》2008年第05期
摘要目的,研究三花龙胆中不同部位龙胆苦苷的含量。方法,采用HPLC法,以甲醇水(65:35)为流动相,274
m为检测波长。结果,三花龙胆中不同部位龙胆苦苷的含量:根茎叶花。
关键词三花龙胆龙胆苦苷HPLC含量测定
龙胆入药历史悠久,早在《神农本草经》中就有关于龙胆形态及性味的初步记载,列为中品。龙胆味苦,性寒,入肝、胃经,有泻肝胆实火,除下焦湿热的功效。三花龙胆是龙胆的来源之一,主要分布在黑龙江、吉林、辽宁等地。本文采用HPLC法测定了三花龙胆中不同部位龙胆苦苷的含量,以便于合理的开发新的药用资源。
1实验材料
11仪器:Waters515高效液相色谱仪(美国);SPD10A紫外检测器;色谱柱(46mm×250mm);10μl进样器。
12材料:龙胆苦苷对照品(中国药品生物制品检定所);三花龙胆购于哈尔滨市郊,经鉴定为龙胆科植物三花龙胆的干燥根、茎、叶及花;甲醇(色谱纯)。
2含量测定
21色谱条件:色谱柱HypersilC18柱;流动相:甲醇水(65:35);柱温:室温;流速:1mlmi
;检测波长274
m。
22标准曲线的绘制:精密称取龙胆苦苷对照品1250mg,置10ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。分别取对照品溶液2、4、6、8、10μl,测得各峰面积。以对照品进样量
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为横坐标,峰面积为纵坐标,计算得回归方程:Y138×106X69×104,相关系数r09996;结果表明龙胆苦胆在25~125μg呈良好线性关系。
23精密度试验:取同一对照品溶液,重复进样5次,每次10μl,连续测定,峰面积RSD为131。
24稳定性试验:取同一对照品溶液,每20mi
进样一次,重复进样5次,峰面积的RSD为196,表明在100mi
内基本稳定。
25重复性试验:精密称取同一批号龙胆药材粉末05g(
5),按样品液的制备操作,其含量的RSD为152。
26回收率试验:精密称取已知含量的样品05g
5,分别精密加入龙胆苦苷对照品180、190、200、210、220(mg),按样品液的制备操作,测定,平均回收率为9757,RSD为181。
27样品的含量测定271样品液的制备:分别称取三花龙胆的不同部位根、茎、叶、花的干燥粉末(过4号筛)05g同时另取本品粉末测定水分,精密称定,置于10ml容量瓶中,加甲醇至刻度,置超声波清洗中超声提取40mi
,取出,摇匀,室温静置30mi
,过滤至10ml容量瓶中,滤渣用少量甲醇分数次洗涤,洗出r