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慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA定量检测及其临床意义的探讨
目的探讨慢性乙型肝炎血清HBVDNA水平与HBV标志物(HBVM)表现模式、肝功能状态的关系并分析其临床意义。方法对173例慢性乙型肝炎患者采用荧光定量PCR法检测血清中HBVDNA含量,ELISA法检测血清HBVM,拜尔560全自动生物化学分析仪检测肝功能,并进行比较分析。结果血清HBVDNA水平与HBVM表现模式有一定关系,HBeAg阳性者HBVDNA均阳性,且为高水平复制,HBeAg阴性抗Hbe阳性者仍有HBV复制,且单抗HBs阳性、单抗HBc、抗HBs和抗HBc阳性均可检出低水平的HBVDNA,HBVDNA含量的高低与ALT无相关关系。结论血清HBVDNA含量与HBeAg有一定的相关性,但HBeAg阴性者病毒未完全停止复制,HBVDNA可真实反映HBV复制;血清HBVDNA与ALT无相关关系。
标签:肝炎病毒;乙型;DNA;PCR;荧光定量
近年建立的荧光PCR方法,为定量观察病毒提供了一个灵敏的检测方法,本院用这一方法检测了慢性乙型肝炎患者的血清HBVDNA含量,现将临床资料齐全的血清HBVDNA水平与HBVM标志物(HBVM)表现模式、肝功能状态的关系作一比较,报道如下。
1资料与方法
11一般资料所有病例均为本院2013年3月~6月住院及门诊的各型肝炎患者,共173例,男128例,女45例,年龄12~62岁,平均(319±107)岁。诊断与分型均符合传染病与寄生虫学术会议修订的标准1,其中慢性肝炎143例,活动性肝炎肝硬化20例,慢性重型肝炎10例,排除重叠或混合感染的病例。
12方法
121HBVDNA定量检测试剂盒购于深圳匹基生物工程有限公司,所有操作均由专人严格按说明书操作,试剂盒的灵敏度为103copiesml,仪器采用罗氏公司定量PCR仪,依据Taqma
原理对模板DNA进行实时在线定量检测。
122HBVM检测采用ELISA法,试剂由上海科华公司提供,由专人严格按说明书操作。
123肝功能检测采用拜尔560全自动生物化学分析仪检测,以入院时第一次检查结果进行比较。其中血清ALT的正常参考值为40UL。
13数据处理与统计学方法HBVDNA数值取对数进行分析,统计学方法采用t检验。
2结果
f21HBeAg与HBVDNA含量及ALT的关系见表1。
22不同HBVDNA含量HBeAg及血清ALT的关系见表2。
23在173例患者中有2例单抗HBs阳性、2例单抗HBc、1例抗HBs和抗HBc阳性患者均检出HBVDNA,其滴度为256×103~11×104copiesml,呈低水平复制。
3讨论
HBV感染的传统血清学诊断方法多采用ELISA法检测,该方法敏感性较PCR低,且还难以准确反映HBV的复制水平,更不能表达血清HBV的含量,我们采用实时荧r
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