定采用API细菌数值鉴定系统,这同时能测定20项以上生化指标,可用做快速鉴定细菌的长形卡片(21cm×45cm,法国生产),上面排列着20个塑料管,管内加有适量糖类等生化反应的干粉(有标签标明)以及反应产物的显色剂。每份产品都有薄膜覆盖,这样保证了无杂菌污染。使用时,首先打开内部附有的一瓶无菌基本培养基(液体),用来稀释待鉴定的纯菌落。把配制成的浓度适中的细菌悬液用无菌滴管逐个以01mL的量加入到每个小管中。在经过24~28h保温后,观看每个小管是否发生了显色反应。将结果记录在相应表格中,然后按照规定对结果进行编码、查检索表,就可以获得该菌种的鉴定结果。6药敏实验药敏实验采用的是纸片法(购自杭州某微生物试剂公司),选用在生产上常用的药物进行实验研究。首先进行细菌培养,用无菌生理盐水洗后吸取02mL菌液在LB固体培养基平板上进行均匀涂布。贴上药敏纸片,设4个平行实验组。放置于28℃的恒温培养箱中培养24h。观察有无抑菌圈产生,同时记录抑菌圈直径,计算其平均值。然后再重复做1次实验,最后依据抑菌圈直径比值照判断标准得到药敏实验结果。7临床用药根据药敏实验结果和池塘情况使用药物治疗。二、结果1病原菌分离与纯化培养结果在LB固体培养基上形成菌落为其菌落形态:圆形、圆滑、湿润边缘整齐、微凸、半透明、灰白色至淡黄色中等大小的菌落,易挑取。
f龙源期刊网httpwwwqika
comc
2分离菌菌镜检结果革兰染色阴性,短杆菌,悬滴标本观察动力,运动活泼(见图1)。3分离菌生理生化实验结果结果见表1。4药敏实验结果分离菌药敏实验结果见表2。5临床治疗结果用药:第1天,阴雨天,死亡15条左右,上午10:00,“鳃皮肠利康”(1包)拌两包料。第2天,阴雨天,死亡6条,17:00,“鳃皮肠利康”(1包)拌1包料。第3天,阴天,死亡6、7条,10:00喂“鳃皮肠利康”(1包)拌2包料。之后,草鱼死亡量明显减少,病情基本得到控制。三、讨论根据分离菌的形态特征、培养特性和生化特性等实验结果确定该分离病原菌为气单胞菌。气单胞菌广泛分布于自然界中,能从表层和地下来源的饮用水中分离出该菌,气单胞菌属已经被国际上列为肠道致病菌之一,是危害草鱼的主要病原菌之一,感染后可发生胃肠炎、外伤感染和败血症并具有高病死率。实验从草鱼的肝脾肾等组织中分离出了气单胞菌,为临床治疗提供了理论依据。但由于时间等多种条件限制,不能做回归实验。由药敏实验结果可知病原菌对“鳃皮肠利r