龙源期刊网httpwwwqika
comc

一例病死鱼的温和气单胞菌分离鉴定及药敏试验
作者：孔海明来源：《农家科技下旬刊》2017年第07期
摘要：草鱼是我国渔业的主要养殖品种之一，属于鲤形目鲤科雅罗鱼亚科草鱼属的一种，又称白鲩，草根鱼，厚鱼。在生产实践中，草鱼的细菌性疾病时有发生，严重制约了草鱼产量的大幅度提高和品质的提升。因此，本文对一例气单胞菌引起池塘草鱼死亡案例进行分析。关键词：草鱼；养殖；细菌疾病；药敏试验随着人们对草食性鱼类的需求越来越大，草鱼的养殖也愈来愈热。草鱼性活泼，游泳迅速，常成群觅食。为典型的草食性鱼类。在干流或湖泊的深水处越冬。生殖季节亲鱼有溯游习性。但是草鱼疾病多，细菌性病原致病的情况很严重，且难控制，易造成大量死亡。因此，为提高草鱼养殖率，应加强对草鱼细菌性疾病的病原菌分离与鉴定来防治草鱼病害。一、材料和方法1发病草鱼2016年3月份，某草鱼养殖池塘出现草鱼死亡现象，池塘面积8×667m2，3台叶轮式增氧机，水深18m，池内有7500kg鱼，养殖前没有清塘，从3月中期开始，每天死亡十几条，观察发病草鱼，鱼体表发红，尾鳍发白，鳃盖、鳍条充血，剪开肚子有腹水，肝脏发黑，肠空、发红。2实验材料LB固体培养基、70酒精、冰箱、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、显微镜、培养皿、烧杯、研钵、试管、接种环、酒精灯等。3病原菌的分离与纯化培养在无菌条件下，先用70酒精对鱼体表面消毒，然后分别取草鱼的肝脏、肾脏、脾脏于无菌研钵中捣碎。分别加少量无菌水后分别划线接种于LB固体培养基平板上，放入28℃恒温培养箱中培养24h。选取平板上的优势菌落进行纯化培养，最终培养至3～5代后获得形态一致的纯菌落。选取单个菌落经过涂片、HE染色、镜检，确认为纯培养物。选取一个优势菌落，在LB固体培养基斜面上80℃冰箱保存（通过抑制酶的活性来抑制细胞的生命活动的方式延长细胞存活时间），备用。
f龙源期刊网httpwwwqika
comc
4分离菌落观察将纯培养物接种于LB固体培养基平板上，在28℃恒温培养箱中培养24h，观察并记录培养出的细菌菌落特征。将获得的纯培养物进行革兰染色。在载玻片上加1滴无菌水，用接种环挑取少许菌落与无菌水混合并进行均匀涂布。经自然干燥、火焰固定后，用草酸铵结晶紫染液染色1～2mi
，加水冲洗，再加革兰碘液后1～2mi
，加水冲洗，再加复红酒精染液等50～60s后加水冲洗。等待干燥后镜检。菌体被染成紫蓝色为阳性，被染成红色则为阴性。5病原菌的鉴r