ELISA技术的质量控制
彭静孙自镛E
gvall和Perlma
于1971年首先建立了酶联免疫吸附试验（e
zymeli
kedimmu
osorbe
tassayELISA）。随着科技的发展，ELISA在抗原、抗体、酶、固相载体及包被技术等方面都有较大的进步，其灵敏度和特异性均大大提高。由于该技术具有简便、快速、经济等特点，因而已被广泛应用于各行业。尽管如此，ELISA在应用过程中仍然存在着许多难点，必须严格控制才能保证检测的质量。ELISA质量保证是一个复杂的过程，许多环节都影响到检测的质量。现分述如下：1方法学的影响ELISA测定模式包括以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法，其中竞争抑制法因受操作时差所引起的不公平竞争等因素的影响，结果重复性较差，质量较难控制。2试剂因素21试剂的选择免疫检测的原理均基于抗原抗体反应。由于影响该反应过程的因素较多，如普遍存在基质效应、交叉反应等，因而检测结果难以溯源，不同方法、不同试剂之间甚至同一试剂不同批号间结果均缺乏可比性。试剂质量在很大程度上决定了检测的水平，因此在引入新项目之前必须对试剂进行严格的评估。试剂的评估有以下几个步骤：⑴确定开展该项目的必要性；⑵了解该项目现有的检测方法和原理；⑶在了解试剂的组成基础上选择多家试剂盒进行比较，判断标准首选参考方法或参考物质，其次为临床的满意度及权威机构的报告如各级室间质量评价、CDC报告等；⑷定期对检测结果进行追踪反馈直至最终认可该试剂。22试剂的准备不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量完全一致，即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差异，订购长批号的试剂，并保证保存条件既可保证结果的重复性又可避免因试剂批号改变而重新建立质控体系及重新评估试剂的复杂过程；对于效期短、使用率低的试剂，应当小量分装，避免反复冻融造成试剂的失效。试剂使用前必须平衡至室温，否则会影响检测下限。未用完的室内质控品及本次不需使__________________作者单位：430030，华中科技大学同济医学院附属同济医院
f用的试剂应密封并及时放回冰箱保存。3样本因素标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素，前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等，后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。其中外源性干扰因素是我们在检测过程中可以避免的，而避免内源性因素的干扰则主要通过选择合适的试剂盒。在临床中遇到少见的疑难r