冰冻切片苏木素伊红染色步骤
1组织包埋,OCT1用铝箔纸盖子造个模出来2在里面放入一些OCT3将96孔板垫在液氮上,再将放入OCT的模子放在
96孔板上,防止铝箔纸模接触液氮4待OCT凝固后,取出,将修剪好的组织放在凝固
的OCT上,然后再用OCT将组织包埋起来,不要包埋太多5继续放回液氮,待OCT全部凝固后,放入80°冰
箱保存6需要切片时,取出,放入冰冻切片机中,使之恢复
一段时间,大约30mi
60mi
2冰冻机上切片3固定:1将切好的片子自然晾干;
2固定液A30s60s3水冲洗30s
f4固定液B60s固定液A配置方法:80中性福尔马林1995乙醇1冰醋酸固定液B配置方法:75无水乙醇25冰醋酸中性福尔马林:90PBS1040甲醛4取出已经切好及固定好的冰冻切片(存放方法:短期放入泡沫盒中,放少许水,制作成湿盒保存切片;长期放入20度冰箱保存,防止组织变形)5苏木素染色10mi
(成熟苏木素制作方法,加入碘酸钠:02g碘酸钠L苏木素)6水冲洗71盐酸乙醇5s(方法:放进去,取出来,重复五次,使得细胞核与细胞质分化)1hcl99无水乙醇8放入水中10mi
9放入伊红5mi
10然后80,95,100乙醇依次洗过每个2s,将伊红洗净
f11放入二甲苯12s12第一滴中性树脂在组织上,轻轻放上盖玻片,防止气泡13吹干,读片。
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