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分光光度法同时测定维生素C和维生素E
一、实验目的
学习在紫外光谱区同时测定双组分体系维生素C和维生素E。
二.实验原理
维生素C和维生素E在食品中能起抗氧化作用,即他们在一定时间内能防止油脂变性。维生素C是水溶性的,维生素E是脂溶性的,但是他们都溶于无水乙醇,因此能在同一溶液中,用与可见分光光度法测定双组分相同的原理,在紫外区测定它们。
二、仪器与试剂
(1)仪器
紫外可见分光光度计(T6)、石英吸收
池一对、50ml容量瓶9只、5ml,10ml吸量管各两只。(2)试剂维生素C、维生素E、无水乙醇
f实验内容与操作步骤三、实验内容与操作步骤
(1)准备工作①.清洗容量瓶、吸量管等玻璃仪器备用。②.检查仪器,开机预热20mi
,并调试至工作状态。(2)配置系列标准溶液①.配制维生素C系列标准溶液:分别吸取浓度为750105molL维生素C母液400ml、600ml、800ml、1000ml于4只干结的50ml容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀。②.配制维生素E系列标准溶液:分别吸取浓度为113104molL维生素E母液400ml、600ml、800ml、1000ml于4只干结的50ml容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀。③.试样的制备:取未知试样500ml于一干结的50ml容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度。
四、实验记录及数据处理
1、绘制吸收光谱曲线
①Vc吸收光谱曲线λ220230240250260A05770737102010541004270087028029030031032007800696052403590185
fVc吸收光谱曲线121080604020200220240260λ280300320340AA
②Ve光谱吸收曲线λ220230240250260A05780737101110350991
Ve光谱吸收曲线121080604020200220240260λ280
2700841
28029030031032007450655048703280166
A
A
300
320
340
2、绘制工作曲线
①Vc工作曲线
A09831034C(molL)000000600000091065110500000120000015
f图表标题112111081061041021098096000000050000010000015
y13233x09078R209909
A线性A
000002
②Ve工作曲线
CA000000904000001356000001808000002260978102210361051
图表标题108106104102109809600000005000001c00000150000020000025A51549c09402R209131
A线性A
3、试样的测定λ(
m)A4、数据处理
由光谱吸收曲线得:Vc、Ve的最大吸收波长均为250
m,
A
2400999
2501030
f在λ240
m时,
εVcεVeA1020113105Lmolcmbc19106A1011746104Lmolcmbc11356105
在λ250
m时,
εVcεVe1054A117105Lmolcmbc19106A1035763104Lmolcmbcr
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