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分光光度法(比色、紫外、红外、原子吸收)。(4)色谱法:柱色谱(吸附或分配)、薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)和高效液相色谱法(GC)。1TLC:吸附剂、展开剂、显色剂;比移值(Rf)2GC、HPLC、GCMS、HPLCMS:tR;定量方法:面积归一法、外标法(标准曲线法、外标一点法、外标两点法)、内标法。生药DNA分子遗传标记鉴定是指通过比较生药间DNA分子遗传多样性差异来鉴别生药基源,确定其学名的方法。生药鉴定的一般程序:1、生药的取样;2、生药的常规检查:杂质检查、水分测定、灰分测定、浸出物测定、挥发油测定;3、生药的限量:砷盐、重金属、农药残留量、其他有害物质。生药的有效性评价一、生药化学成分分析方法1紫外可见分光光度法基本原理:朗伯比尔定律AECL适用于:大类成分的含量测定,如总黄酮、总蒽醌、总生物碱等。含量测定法:对照品比较法、吸收系数法、标准曲线法。2色谱法(1)TLC优点:简便、快捷、价廉、适应性广、可操作性强。判断依据:斑点颜色、Rf值(2)HPLC检测器:紫外检测器(UVD):灵敏度高;须有紫外吸收二极管阵列检测器(DAD)、荧光检测器(FLD)、示差折光检测器(RID)、蒸发光散射检测器(ELSD):灵敏度低;通用型质谱检测器(MSD):价高;稳定性差含量测定法:内标法加校正因子、外标法、面积归一化法(3)GC优点:应用较广、精密度高、分离效果好缺点:所得数据只有保留时间检测器:火焰离子化检测器(FID)、电导检测器(TCD)、氮磷检测器(NPD)、火焰光度检测器(FPD)、电子捕获检测器(ECD)、质朴检测器(MSD)。测定法:内标法加校正因子、外标法、面积归一化法、标准溶液加入法(4)其他高效毛细管电泳法(HPCE)毛细管电色谱(CEC):环保;重复性差。二、定量分析方法的方法学检验目的:证明采用的含量测定方法适用于相应分析要求。适用:进行定量分析方法学研究或起草药品质量标准时。1准确度做加样回收率测定回收率CAB100其值接近100A:供试品所含被测成分量B:加入对照品量C:实测值(≈AB)2精密度重复性:同一条件同一样品;相对标准偏差RSD一般不大于3中间精密度:不同日期、不同分析人员、不同设备重现性:不同实验室、不同分析人员3专属性4检测限信噪比SN35定量限信噪比SN106线性UV法测定时,相关系数r应大于09999;HPLC测定时,浓度点
57,相关系数r应大于0999。7范围8耐用性系指在测定条件有小的变动时,测定结果不受影响的r
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