细胞传代次数太多后会影响细胞的形态及功能，将不利于进行细胞实验。同时，如果在传代过程中，培养的细胞太多时，可将多余细胞置于液氮中进行长期冻存，为后续实验备存足够细胞。
f四、细胞计数
实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。细胞计数（1）先用巴氏管将细胞悬液混匀（2）将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3mi
，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。用枪吸取54ul细胞悬液放在一片塑料纸上。（3）再吸取6ul台盼蓝染色液混入吸出的细胞悬液中。（4）用枪头混匀混合液（5）准备好细胞计数板，酒精棉球擦拭一遍。吸10ul细胞悬液沿盖玻片吹入，冲入池中，注意不要冲到两边的沟里。（6）用20倍的显微镜计数，计数原则数上不数下，数左不数右。（7）稀释倍数计算605411（8）计数公式（4个大方格细胞总数4）×104×稀释倍数（11）个ml（9）说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：10mm（长）×10mm（宽）×01mm（高）01mm3而1ml1000mm3
f（10）注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞
计算，若细胞团10以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液）
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