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核酸提取原理及经验总结
一、核酸核苷酸单体聚合而成的生物大分子,是生物细胞最基本和最重要的成分。一般认为,生物进化即始于核酸,因为在所有生命物质中只有核酸能够自我复制。今天已知核酸是生物遗传信息的贮藏所和传递者。一种生物的蓝图就编码在其核酸分子中。核酸是1869年米歇尔FMiescher在脓液的白细胞中发现的。他当时称之为核素。阿尔特曼RAltma
于1889年认识其酸性后,定名为核酸。二、核酸的分类和功能核酸分为核糖核酸RNA和脱氧核糖核酸DNA两大类。这两类核酸有某些共同的结构特点,但生物功能不同。DNA贮存遗传信息,在细胞分裂过程中复制,使每个子细胞接受与母细胞结构和信息含量相同的DNA;RNA主要在蛋白质合成中起作用,负责将DNA的遗传信息转变成特定蛋白质的氨基酸序列。核酸的基本结构单元是核苷酸,核苷酸含有含氮碱基、戊糖和磷酸3种组分。碱基与戊糖构成核苷,核苷的磷酸酯为核苷酸。DNA和RNA中的戊糖不同,RNA中的戊糖是D核糖;DNA不含核糖而含D2脱氧核糖核糖中2位碳原子上的羟基为氢所取代。核酸就是根据其中戊糖种类来分类的,DNA和RNA的碱基也有所不同。下面我们看看DNA和RNA具体的差别:(一)DNA的分子结构1DNA的碱基组成规律:Chargaff等根据分析各种生物及其不同
f组织内DNA样品水解液中的碱基含量的结果,得出以下结论:1)同一生物不同组织的DNA样品,其碱基成分含量相同。2)不同生物的DNA碱基成分含量不同。3)对某一生物讲,其碱基成分的含量不受年龄、营养及环境变化等影响。4)在同一生物的DNA碱基含量是AT,GC,AGCT,碱基之间的这种关系称Chargaff法则。2DNA分子的基本结构:核酸分子内单核苷酸之间的连接键为35磷酸二酯键,是共价键。DNA分子的基本结构就是许多脱氧核糖核苷酸借磷酸二脂键相互连接而成的多核苷酸链。DNA链中碱基的组成和排列顺序即为DNA的一级结构。DNA的遗传信息即储存在DNA分子的碱基排列顺序中。
DNA分子的空间结构:DNA的二级结构是双螺旋结构,其特点为:1)两条链方向相反、相互平行、主链是磷酸戊糖链,处于螺旋外侧。2)碱基在螺旋内侧并配对存在,A与T配对的G与C配对,A与T之间二个氢键相连(AT),G与C之间三个氢键相链(GC)。3)螺旋直径2
m,二个碱基对平面距0。34mm,10bp为一螺距,距离为3。4
m。4)稳定因素主要是碱基之间的氢键和碱基对平面之间的堆积力。(二)RNA的分子结构RNA的基本结构是A、G、C、U四种碱基组成的核糖苷酸通过磷酸二酯键相链而成的多核苷酸链。有三种主要的RNA:据其r
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