偏振光激发后能产生偏振荧光,样品中的待测物的量越大,偏振荧光的强度越高。13荧光淬灭免疫测定法荧光淬灭免疫测定法Fluoresece
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oassay的原理是当荧光标记物与抗体结合后发生荧光淬灭。荧光猝灭的机制尚不清楚,荧光淬灭可能与标记物与抗体结合后导致电子振动状态的改变有关。14荧光增强免疫测定法荧光增强免疫测定法Fluoresece
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oassay的原理与荧光淬灭增强免疫测定法相似,不同的是标记物与抗体结合后荧光强度增强。
2酶免疫检测技术在食品检测中的应用酶免疫检测技术是20世纪60年代在荧光和组织化学的基础上发展起来的一种新技术,最初用酶代表荧光素标记抗体作为生物组织中抗原的鉴定和定位。随后发展为用于鉴定
f免疫扩散及免疫电泳板上的沉淀线。到1971年,E
grall等用碱性磷酸酶标记抗原或抗体,建立了酶联免疫吸附试验ELISA,这一技术因其高度的准确性、特异性、应用范围广、检测速度快以及费用低等优点,是目前食品检测中令人瞩目的有发展前途的一种新技术。酶免疫技术发展迅猛,种类繁多,酶免疫技术分为酶免疫组化技术和酶免疫测定技术,酶免疫测定技术又分为均相免疫测定技术和异相免疫测定技术,异相免疫测定技术又分为固相免疫测定技术和液相免疫测定技术ELISA技术把抗原抗体特异性与酶反应的敏感性相结合,使食品在未经分离的提取的情况下,即可进行定性和定量分析。近年来,该技术在食品安全检测中正逐步推广应用,用于细菌及其毒素、真菌及其毒素、病毒、寄生虫的检测,LyerMS和Cousi
MA等人研究用间接ELISA法来检测食品和饲料中镰刀菌的灵敏度和特异性可检测出102~103cufmL的含量。王彩云等应用酶联免疫方法测定奶粉中的黄曲霉毒素M1,多次实验重复测定结果的变异系数最大为111实验的结果比较精确重现性较好;总体平均回收率达925。还用于蛋白质、激素、农业残留、兽药残留和抗生素及食品成分和劣质食品的检测分析。1993年王勇等建立了测定三唑酮的ELISA方法应用于黄瓜、梨等食品的检测其最低检出限为40
gg回收率为9244~9818与用气相色谱检测的结果吻合。2006年,AlDujailiEAS利用ELISA方法对尿样中的睾酮进行检测,合成睾酮抗原在羊体内获得抗体,其抗稀释度可达1200000。尿样经二氯甲烷萃取、净化、吹干、标准溶液的零样复溶后,进行ELISA检验,其灵敏度可达12pgmL7。Fra
k等采用不同连接臂的单环或双环半抗原分子与载体蛋白连接分别制得免疫原包被原和酶标抗原。由双环抗r