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本次实验项目:
氨基酸纸层析
本次实验课时:4学时实验类型:验证性
教学要求:通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基本原理及操作方法掌握氨基酸纸上层析法的操作技术(点样、平衡、展层、显色、鉴定)原理,能够对实验结果做出正确判断重难点::氨基酸纸上层析法的操作技术点:纸层析法的基本原理
教学手段及教具:课堂讲授,学生实验操作。
讲授内容及时间分配:课堂讲授课堂讲授1.实验目的………………………………………………………………………………02学时2.实验原理………………………………………………………………………………03学时3.仪器、材料和试剂……………………………………………………………………02学时4.操作步骤及注意事项…………………………………………………………………03学时实验教学氨基酸纸层析的操作………………………………………………………………………4学时
参考资料
《生物化学实验》指导书
f氨基酸纸层析法(验证性)
相关知识1层析法(色谱法):是一种物理的分离方法。它是利用混合物中各组分的物理化学性质的差别,使各组分以不同程度分布在两个相中,其中一个相为固定的(称为固定相),另一个相则流此固定相(称为流动相)并使各组分以不同速度移动,从而达分离。2.几种常用的层析法①吸附层析②离子交换层析③薄层层析④凝胶层析(凝胶过滤)⑤亲和层析⑥分配层析(适于在水,有机溶剂中都可溶的混合物)当把一种物质在两种不混溶的溶剂中振荡时,它将在这两相中不均匀的分配。达到平衡时,这种物质在两种溶剂中的浓度之比是一个常数,即分配系数。α=物质在溶剂I中的浓度物质在溶剂II中的浓度
如果某一混全物的各组分在这两相中的分配系数有足够的差异,它们就可以被分离。3.氨基酸的极性大小及各氨基酸结构一、实验目的1.通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基本原理及操作方法2.掌握氨基酸纸上层析法的操作技术(点样、平衡、展层、显色、鉴定)二、实验原理纸层析法是分配层析的一种,以滤纸作为惰性支持物。层析溶剂(扩展剂)由有机溶剂和水组成。在纸上水被吸附在纤维素的纤维之间形成固定相。由于纤维素上的羟基具有亲水性,和水以氢键相连,使这部分水不易扩散,所以能与跟水混合的溶剂仍然形成类似不相混合的两相。当有机相沿纸流动经过层析点时,层析点上溶质就在水相和有机相之间进行分配,有一部分溶质离开原r