BCA蛋白检测方法
Bici
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icacidBCA法是近来广为应用的蛋白定量方法。其原理与Lowery法蛋白定量相似，即在碱性环境下蛋白质与Cu2络合并将Cu2还原成Cu1。BCA与Cu1结合形成稳定的紫蓝色复合物，在562
M处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度。与Lowery法相比，BCA蛋白测定方法灵敏度高，操作简单，试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳，并且受干扰物质影响小。与Bradford法相比，BCA法的显著优点是不受去垢剂的影响。BCA定量中的A和B液
BCA定量中的A和B液的成分是什么，作用是什么？试剂A：BCAbici
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cacid碱性溶液试剂B：硫酸铜溶液作用：BCA与二价铜离子的硫酸铜溶液等其他试剂组成的试剂，混合后显示苹果绿色。在碱性条件下，BCA与蛋白质结合时，蛋白质将Cu2还原为Cu，一个Cu螯合两个BCA分子，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物。
试剂1试剂A含1BCA二钠盐、2无水碳酸钠、016酒石
f酸钠、04氢氧化钠、095碳酸氢钠，将上述液体混合后调pH至1125。（2）试剂B：4硫酸铜。（3）BCA工作液：试剂A100mL试剂B2L，混合。（4）蛋白质标准液：准确称取150mg牛血清白蛋白，溶于100mL蒸馏水中，即为15mgmL的蛋白质标准液。5待测样品。
1、将上述各管混匀后于37°C保温30分钟，用562
m波长比色测定吸光度值。2、以蛋白质含量为横坐标，光吸收值为纵坐标绘制标准曲线。3、用测定管光吸收值在标准曲线上查找相应的蛋白质含量，再计算出待测血清中蛋白质浓度（gL。
待测样品浓度在50～2000微克／毫升浓度范围内有较好的线性关系
BCA蛋白检测
fBCAProtei
Assay是基于在碱性条件下，Cu2被蛋白还原成Cu，进而发生高敏感性和选择性的颜色变化，通过分光测定，精确定量蛋白质浓度。此方法与Bradford蛋白检测一道，并列成为当今世界上最为常用的两种蛋白浓度检测方法。特点：1．高兼容性，尤其适用于表面活性剂存在下的蛋白浓度检测，如细胞或组织的蛋白提取物。2．高敏感度。可精确定量1～2000μgml蛋白样品。3受温度和时间影响较大，需准确定时、定温，以保证蛋白的精确定量。4检测蛋白提取物或纯化蛋白样品，应使用相应的缓冲液制备蛋白标准曲线。同时样品的检测条件要与蛋白标准曲线的检测条件保持一致，如37℃放置30分钟。5562
m测定，也可用接近的波长检测，如570
m。6此检测试剂不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可兼容样品中高达5的SDS，5的Trito
X100，5的Twee
20，60，80。但受螯合剂和略高浓度的还r