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污染和干扰,从而引起所用菌不能生长或酶产量大幅度下
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降。因此,生物发酵过程的关键是有效地避免杂菌的干扰和污染,即避免染菌。
为避免染菌,在工艺设备及配管设计中需采取的措施主要有:a、工艺过程采用全密闭工艺,始终维持系统正压,防止渗漏带入杂菌。b、合理设置无菌室,使菌种不受污染,此为防止染菌的重点措施。c、发酵用空气采用冷却水冷却,控制露点在10℃左右,保持空气千燥,同时用过滤器消除杂菌。达到无菌、无油、干燥条件。d、设备及配管设计要避免有消毒蒸汽灭菌不到的死角,设备内表面应保持光洁,顶部有排气阀,阀门采用发酵专用阀门抗生素截止阀,管道设计不留流体不流动的空间。e、对培养基营养液及发酵设备设置蒸汽消毒灭菌流程,以保持系统各部位均可有效地消毒,消除杂菌存留的空间。f、管道焊接采用惰性气保护焊,以使焊口内表面平整,消除由于焊口局部空隙而使消毒操作不彻底从而引起染菌的现象。g、对发酵系统管道进行气密性试验,保证系统密闭,防止渗漏染菌。23生物催化剂制造固定化细胞
固定化细胞是微生物法AM工艺技术的一个重要部分,其目的是将含有AN水合酶细胞的发酵液固定于某种载体上,制造出固体颗粒生物催化剂。经过中试装置试验,确定采用以海藻酸钠为载体的包埋法。这种方法具有造粒工艺简便,酶活力高,反应后固定化细胞容易分离的优点。海藻酸钠以氯
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化钙水溶液为固化剂,海藻酸钠及氯化钙水溶液的浓度分别为202M时较为合适。固化工艺条件:固化温度4℃,固化时间2024h,物料配比为8含菌发酵液海藻酸钠02M氯化钙1002300。此外,为了生物催化剂颗粒均匀,应使发酵液与海藻酸钠混合液流出造粒机的速度恒定。24AN水合反应浓度、温度控制
采用微生物法生产AM,其AN水合反应是在生物酶作用下完成的。生物催化剂在反应液中AN浓度高于5质量时将中毒失效。另一方面,AN水合反应为放热反应,反应温度将随生成物AM浓度的增加而升高,温度升高对反应有两方面的不利影响,一是生物催化剂在高温下易失效;二是在高温条件下,反应产物AM易自聚。因此,AN水合反应需严格控制反应液浓度,同时根据反应过程中产物的浓度变化控制反应温度。本设计采用近红外浓度分析仪在线检测反应液中AN、AM浓度,用AN浓度信号调节AN加料泵电机用电频率以实现AN加料量自动调节,控制反应液中AN浓度;用AM浓度信号调节反应釜冷却水量以实现反应r
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