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LAMP技术及其在食品安全检测中的应用
作者:张艺馨来源:《商情》2020年第24期
【摘要】LAMP技术(环介导等温扩增技术)是一种新型的体外等温扩增特异核算片段技术,该技术具有灵敏度高,扩增效率腔以及特异性强等优势。本文简单介绍LAMP技术,并探讨LAMP技术及其在食品安全检测中的应用
【关键词】LAMP技术食品安全检测
LAMP技术(环介导等温扩增技术是由日本研究人员在2000年发明的一种新型的体外等温扩增特异核算片段技术。该技术通过对特殊引物与有链置换活性的Bst(芽孢杆菌嗜热脂肪酸)DNA聚合酶,使反应在模板两端的引物结合处循环出现环状单链接结构,从而在等温条件下促进引物与模板的顺利结合以及链置换扩增反应的形成。相关资料显示,LAMP会在60分钟内扩增出109至1010倍的靶序列复制,从而使DNA浓度高达500txgmL。LAMP技术中的扩增产物可以通过常规的荧光定屠以及电泳检测。在对食品安全进行检测时应用LAMP技术,可明显提高检测质量,且时间短,灵敏度高,目前在食品安全检测领域中应用十分广泛。
一、简述LAMP技术的原理及特点
(一)LAMP技术的原理
LAMP技术的核心是针对靶基因的六个区域中的四条特殊引物进行相关设计,并对具有链置换活性的BstDNA聚合酶进行反应。在LAMP技术的反应过程中,会对靶基因的6个不同区域进行设计,例如设计1号对应外引物F3与D3,1对内引物FIP以及BIP,并加入具有置换链作用的DNA聚合酶。在温度保持在60到65摄氏度时,对DNA片段特异性基因序列上的6个单独区域进行扩增,反应过程中会产后白色的焦磷酸镁沉淀物。
(二)LAMP技术的特点
LAMP技术具有特晃性强,检测速度较快,且检测灵敏度较高,并且检测过程中可以清晰的观察检测过程,可脱离仪器进行现场检测等特点。
二、LAMP技术在食品安全检测中的应用
LAMP技术可以从食品中的致病微生物以及转基因食品安全性等方面进行食品安全监测。
(一)LAMP技术在致病微生物中的检测应用。
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病原微生物室食品安全中造成食品生物污染的主要原因。常规的检验方式通过对病原微生物进行分离培养或者生活试验进行检测,但是会耗费大量的人力物力,且时间较长,而且类似于大肠杆菌等细菌在机体营养匮乏的环境下会进入休眠状态,而进入适宜的环境后会马上复苏,就导致常规检测中相关性质的细菌会产生漏检。应用LAMP技术可以避免该现象的发生。LAMP技术可以对大肠杆菌,沙门氏菌等多种食品中的常见细菌进行检测。(1r