2项目的研究内容、研究目标,以及拟解决的关键问题
21研究内容:
221XXXXX化学合成与鉴定,二硬脂酸磷酯酰胺XXXXXXXXXX合成
与鉴定。
222不同类型脂质体的制备、技术参数优化、物理性质鉴定和脂质体药
物包封率、载药量、配体结合率鉴定与提高。
223大鼠HSC分离培养,XXXXXXX修饰脂质体与肝星状细胞体外结合
活性研究。
224XXXXX修饰XXXXXXXXX对肝星状细胞活化、增殖、XXXXXXX
信号通路影响。
225XXXXXXXXX的药代动力学特征、组织分布特征和XXXXXXX研
究。
f226XXXXXXXX对胆总管结扎和CCl4大鼠肝纤维化防治作用。
22研究目标:
221研究构建XXXXXXXX,为抗肝纤维化药物新剂型开发提供新型靶向载体。222研究XXXXXX对HSC生物活性影响及机制,为中西药结合肝纤维化双靶向、多靶点、协同治疗提供理论基础。223研究XXXXXXXX体内HSC靶向性及防治实验性肝纤维化的有效性,为开发中药新剂型、提高药物在靶组织浓度、降低有效剂量、减轻副作用和提高疗效提供实践基础。
23拟解决的关键问题:
231高药物包封率、高配体修饰率的稳定XXXXXXXX制备。232放射性计数法测定XXXXXX与HSC结合活性,有效抑制HSC活化的剂量、时间参数等。233XXXXXX体内HSC靶向性、抗肝纤维化效果比较与评价。
3拟采取的研究方案及可行性分析31研究方案:
第一部分XXXXX及XXXXX合成1XXXXXX合成及鉴定
采用我们研究室建立的方法,化学合成XXXXXX。应用XXXXXXXXXX。合成反应图示如下。高效液相(HPLC)、质谱等方法鉴定合成产物纯度及分子量。反应图(略)2XXXXXXXXXXX采用一步法合成。XXXXXXXXXXXX。合成反应图示如下。高效液相
f(HPLC)和质谱分析法进物产物纯化与鉴定。反应图(略)
第二部分长循环脂质体制备、鉴定与技术条件优化1脂质体制备
采用经我们改良的逆相蒸发法制备。具体方法如下:XXXXXXXXXX。2性质鉴定
XXXXXXXXXXXXXXXX。3均匀设计优化处方
根据实验结果及文献,确定影响包封率的主要因素。以包封率为评价指标,采用二项逐步回归计算回归方程,并进行方差分析,优化条件。
第三部分XXXXX修饰长循环脂质体与HSC体外结合活性采用两步胶原酶灌注和密度梯度离心法分离大鼠HSC,选择静止态和激活态的HSC,接种于6孔板上细胞密度为50×105mL。待贴壁后,1胎牛血清DMEM培养过夜,细胞同步化。1配体结合的浓度效应关系XXXXXXXXXXX。2配体结合的时间效应关系XXXXXXXXXXXX。3竞争抑制XXXXXXXXXX。4细胞荧光定位、配体表面结合率与内吞率测定XXXXXXXXXX。5平衡解离常数Kd和细胞最大结合位点数Bmax
fXXXXXXXXXXX。第四部分XXXXr