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13试管改进法Stadhouders6电泳法检测抗生素。奶样经丙酮和HCl提取,琼脂凝胶电泳,后经嗜热脂肪芽孢杆菌55℃下335h,或蜡状芽孢杆菌变种(Bcereussubspmycoides)30℃下1824h,生物显影,测定抗生素浓度。NouwsJFM7用改进试管法检测四环素、嘧啶、大环内酯类抗生素、利福霉素、三甲氧苄二氨嘧啶和氨基糖苷类抗生素,检测菌种为嗜热脂肪芽孢杆菌,检测低限在欧盟MRL之下。Shita
di8用荷兰试管扩散法检测抗生素,与BSDA法比较,多管法可提高准确度。
f32酶免疫法BleileDM9采用高特异性的单克隆和多克隆抗体检测β内酰胺抗生素,仅需8分钟,对青霉素G和先锋霉素Ⅳ的检测低限分别为5
gml、10
gml。Jackma
10采用竞争性ELISA检测青霉素G,分析内可变性(i
traassayvariatio
)为53,分析外可变性(i
terassayvariatio
)为54,均符合规定。Weber11使用FluorophosBetaScree
4ptest和FLM200fluorometer检测脱脂乳、酪乳、UHT奶和巧克力奶中的青霉素G、氨苄青霉素、阿莫西林、邻氯青霉素和催产素检测低限在MRL附近,特异性间于94100。Kumar12使用固相荧光免疫法测定β内酰胺抗生素青霉素G、氨苄青霉素、阿莫西林、邻氯青霉素和先锋霉素Ⅳ。荧光物质采用Cy55,固相为SiO2毛细管,检测时间3分钟,检测底限达ppb水平。ZhiZL等13使用一种自动流体免疫检测系统检测先锋霉素Ⅳ,检测底限为1ugl,回收率为973。33生物传感器法
Gaudi
14采用BLACORE检测磺胺二甲基嘧啶(SMZ)。即将SPR上的改性羧甲基葡聚糖金属结合传感器为检测因子,检测SMZ。SMZ在0200ugkg之间,两者存在线形关系;检测时间830分钟;检测底限达到17ugkg。并行多孔检测,可同时检测青霉素、四环素、氯霉素和氨基糖苷类抗生素。Setford15将能特异吸附青霉素G的蛋白质固定在基质上,青霉素G同蛋白质结合,引起电流的变化,从而推算其浓度。本方法时间短,灵敏、试剂少,很适合野外操作。Gustavsso
16用SPR上具羧肽酶活性的蛋白质为检测因子,β内酰胺抗生素的含量同它的活性之间存在线形关系。本方法可解决ELISA流量小,微生物法只测活性成分的缺点,并能实现自动检测。对青霉素G的最小检测限为26ugkg,3日检测变动率间于7316。34HPLC
Dase
brock17采用HPLCIPAD(I
tegratedPulsedAmperometricDetectio
,脉冲电流检测)测定氨苄青霉素和先锋霉素Ⅳ,快速、简便。先锋霉素Ⅳ浓度为40、20和10ppb时,提取率分别为74、80和77。而氨苄青霉素浓度为20、10和5ppb时,提取率为67、78和75。
4检测方法比较很多学者研究了r
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