析原理CharmFarmCharmScie
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MA抑制微生物生长CharmCowsideCharmScie
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c青霉素竞争性吸附展示DelvotestPGistbrocadeFoodI
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c抗原抗体吸附LactamTestKitIdetekI
c竞争性酶联免疫ValioT101ValioFi
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tre抑制微生物生长CharmBSDACharmScie
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c抑制微生物生长
f2检测方法筛选策略FDA兽医学中心规定,检测方法敏感性要强,特异性要高。某项方法如要成为法定方法,其检测的最低限值应该在95置信度的情况下,检测FDA规定的安全浓度或允许浓度(safeortolera
celevel,欧盟称为MRL,MaximumResidueLimits)可能性要大于90。可以采取以下策略筛选和评价检测方法2:第一步,初步评价敏感性和特异性。测定特异性时,选择绝对不含抗生素的样品,其中体细胞数量(SomaticCellCou
t,SCC)要106ml,结果为阴性。测定敏感性时,则在奶样中添加MRL水平的抗生素,结果为阳性。第二步,测定最底检测限。使用3060个样本,其中的抗生素含量一般间于20MRL到2倍MRL水平,绘制检测方法对不同抗生素的标准曲线。第三步,评价影响因素。采用含有内毒素,且SCC含量间于2×1066×106个ml的奶样,特异性要达到90以上。第四步,现场检验。各种类型(地区、牧场规模、抗生素类型)的奶样的广泛检测,检测结果同HPLC对照。由此,FDA在Ma85备忘录中将CharmBSDA等15种方法规定为法定检测方法(见表5)。
3几种典型的检测方法按照检测原理和使用的仪器,抗生素的检测方法可分三类:酶法、微生物法和色谱法。31微生物法311BSDA法
最常用的是BSDA法,采用嗜热脂肪芽孢杆菌对抗生素的耐受程度作为检测指标。Ka
gKH3分别采用嗜热脂肪芽孢杆菌、藤黄链球菌(Micrococcusluteus)、嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)等3种细菌检测抗生素,它们对青霉素的检测低限分别为00025Uml、001Uml和003Uml。Ueta4用纸圆盘法检测抗生素,76个无抗生素的奶样中有48个为抗生素阳性,而使用TTC和DelvotestP检测却为阴性。312试剂盒法DelvotestP试剂盒是依据嗜热脂肪芽胞杆菌的生长对培养基颜色的改变为测试指标,黄色为阴性,紫色为阳性青霉素检出限度为0003UmL5。TTC氯化三苯基四氮唑法同样依据显色状态判断结果,未显色者为阳性,微红色者为可疑;桃红色或红色者为阴性。其检测低限见表2。
表2检测各种抗生素的检测底限抗生素名称最低捡出量(Uml)青霉素0004链霉素05庆大霉素04卡拉霉素5
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