细菌鞭毛染色
一、实验目的
学习并掌握鞭毛染色方法，并观察鞭毛的形态。
二、实验原理
细菌的鞭毛极纤细，直径一般为0102um，只有用电子显微镜才能观察到。但是，如采用特殊的染色法，则在普通光学显微镜下也能看到它。
鞭毛染色的基本原理：即在染色前先用媒染剂如单宁酸或明矾钾处理，让它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色（如碱性复红、硝酸银、结晶紫）。常用的媒染剂由丹宁酸和氯化高铁或钾明矾等配制而成。（本次实验用硝酸银当染色剂）
三、实验器材及试剂
1菌种：枯草芽孢杆菌（鞭毛周生）、铜绿假单胞菌（鞭毛端生）。2溶液和试剂：硝酸银鞭毛染色剂A液和B液、95乙醇、蒸馏水。3仪器和其他物品：载玻片、酒精灯、显微镜、双层瓶、擦镜纸、接种环、镊
子、电热炉、大烧杯、洗衣粉
四、实验步骤
鞭毛染色硝酸银染色法1载玻片准备：将载玻片用洗衣粉洗涤后，置于95的乙醇溶液中浸泡20mi
，使用时取出再火焰上烧去乙醇及可能残留的油迹。2制片：取一块载玻片，在一端滴一滴蒸馏水，用接种环无菌操作从枯草芽孢杆菌（铜绿假单孢菌斜面上挑取菌种在载玻片液滴上轻轻蘸一下，使液滴表面形成一薄层菌膜，随后倾斜玻片，使悬菌液缓慢流向另一端，用吸水纸在载玻片边缘处吸去多余菌悬液，自然干燥。3染色：滴加硝酸银染液A液覆盖菌面35mi
后用蒸馏水充分洗去A液，之后用B液洗去残留水分，再滴加B液覆盖菌面数秒至1mi
，其间可用微火加热，当菌面出现明显褐色时，立即用蒸馏水冲洗，自然干燥。4镜检：先低倍，再高倍，最后用油镜检查，菌体呈深褐色，鞭毛呈浅褐色。
f四、实验结果记录
枯草芽孢杆菌鞭毛染色观察图
铜绿假单胞菌鞭毛染色观察图
五、实验结果分析
1理论结果：菌种名称
枯草芽孢杆菌铜绿假单胞菌2实验结果：
鞭毛形态纤细波浪状丝状
鞭毛数量多根一根
鞭毛着生位置周生
一端生
f菌种名称
鞭毛形态
鞭毛数量
鞭毛着生位置
枯草芽孢杆菌纤细波浪状丝状
多根
周生
铜绿假单胞菌
一根或几根
近端生
3铜绿假单胞菌鞭毛实验，观察结果与理论结果差异分析：油镜视野中，铜绿假
单胞菌的鞭毛出现了多根，与理论结果的一根有所差异，其原因可能是染色方法
不恰当或干燥时装片遭到剧烈震动，导致鞭毛脱落，脱落的鞭毛附着在了菌体表
面，造成了一个菌体着生多跟鞭毛的假象。油镜视野中鞭毛着生位置不是严格的
端生而是近端生，可能是光线的折射，菌体形状的变化或菌体的平面观察无法真
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