度离心法分离大鼠HSC，选择静止态和激活态的HSC，接种于6孔板上细胞密度为50×105mL。待贴壁后，1胎牛血清DMEM培养过夜，细胞同步化。1配体结合的浓度效应关系XXXXXXXXXXX。2配体结合的时间效应关系XXXXXXXXXXXX。3竞争抑制XXXXXXXXXX。4细胞荧光定位、配体表面结合率与内吞率测定XXXXXXXXXX。5平衡解离常数Kd和细胞最大结合位点数BmaxXXXXXXXXXXX。第四部分XXXXXXX对HSC生物学特性影响与机制采用酶法分离大鼠HSC。新鲜分离的HSC，体外培养48h后，作为静止期HSC用于下游实验，或培养1w后消化传代，继续培养24h后，作为活化的HSC用于下游实验。1XXXXXXX对HSC活化状态影响XXXXXXXXX。2XXXXXX对TGFβ1效应影响XXXXXXXXXXXX。3XXXXXXXX大鼠HSCTGFβ受体XXXXXXX信号通路影响长循环脂质体制备、鉴定与技术条件优化
fXXXXXXXXXXXXXX。第五部分XXXXXXXXXXXX1XXXXXXXX在肝纤维化大鼠体内的器官分布XXXXXXXXXX。2XXXXXXX大鼠体内药代动力学采用XXXXXXXX。3XXXXXXX在肝纤维化大鼠肝脏内分布采用XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX。第六部分XXXXXXX防治大鼠肝纤维化1造模采用胆总管结扎和CCl4肝纤维化两种动物模型。2分组及处理XXXXXXXXXXXXXX。3治疗效果检测主要比较以下指标：XXXXXXXXXXXXXXX。
32技术路线
技术路线图XXXXXXXXXXXXXXX。
33可行性分析可行性分析可行性
331立项依据有坚实的理论与实践基础。本研究是参阅大量文献并结合自身以往深厚的肝纤维化防治研究基础，特别是结合近四年国家自然科学基金资助研究成果，在XXXX化学合成及功能研究、低剂量XXX抗肝纤维化作用和机制的前期工作基础上，提出的多途径、互补协同与靶向治疗肝纤维化的新探索。掌握了国内外在受体调节药物靶向、低毒性高效中药新剂型开发和以HSC的靶标的肝纤维化靶向治疗中的最新研究动态，借鉴“双靶向”干预的最新研究成果，并与自身实践相结合，在理论上、实践上均有可靠基础。332相关实验技术成熟，实验结果可信。本研究使用的实验方法、动物模型和生物分子化学合成等多为国内外应用多年的经典方法，并有自身实践基础。本课题组由掌握以上技术的成员组成，相关技术已应用于科研工作。333人员配备合理，具有扎实的相关工作基础和完善的实验设备及技术支持。申请人长期从事肝纤维化防治研究，先后承担包括国家自然基金在内的
f各类科研项目15项，指导或协助指导博士后、博士生及硕士生70余名。近四年主持了国家自然科学基金项目“RGD修饰细胞生物信息调控分子和缀合基因的功能研究编号30170412）”和“人卵泡抑素r