相：三乙胺水（含50mmolL1磷酸二氢钾，磷酸调pH至40）甲醇（001∶90∶10vvv）；流速10mLmi
1；检测波长：210
m；柱温：室温。14
手性高效液相色谱法（ChiralHPLC
手性衍生化试剂法（CDR）（分析物）
手性固定相法（CSP）（固定相）
手性流动相添加法（CMP）（流动相）
f
15手性试剂衍生化法（CDR）
原理：光学活性药物与有高光学纯度的手性试剂于分离前衍生
化，在药物对映体中引入另外一个手性，形成非对映异构体，再以HPLC分析。
R

SE
R

S

SASA

RR

SESE
RSASSA
16
手性反应注意事项
手性试剂为高光学纯度试剂，光学稳定性好：

手性待测物必须具备反应活性基团，如胺基（NH2），醇基（OH），羧基（COOH），以保证与CDR反应完全；
生成的非对映体光学稳定，柱效要高，能有效检测。
f17胺类对映异构体异硫氰酸酯（ITC）常用试剂有苯乙基异氰酸酯（PEIC）、2346四O乙酰基
βD吡喃葡萄糖异硫氰酸酯（GITC）。
广泛应用于氨基酸及其衍生物、麻黄碱类、肾上腺素类、肾上腺素拮抗剂、儿茶胺类等药物的分离分析。
18
GITC衍生化分离胺类对映异构体
反应原理
OAcAcO
AcO
ONCS
OAc
NHRR1R2
OAc
AcOAcO
O
SRR1
NHCN
OAc
R2
f在三乙胺存在条件下进行，于乙腈、二氯甲烷或DMF中进行。
19色谱分离和前处理条件优化流动相组成和流动相pH对拆分的影响（1）降低甲醇含量改善分离度，保留时间增加；（2）未衍生化的羧酸基对pH值比较敏感。
衍生化时间及GITC用量的优化（1）反应时间：10mi
30mi
（2）用量：过量两倍20手性拆分结果
f色谱条件：C18色谱柱，流动相：甲醇∶1三乙基乙二氨四乙酸（TEAA缓冲）（pH55），检测波长254
m；1mlmi
。前处理：药物溶于含三乙胺乙腈水溶液，取50μl该溶液，加入50μl含2gLGITC的乙腈溶液，混合均匀后室温下放置10mi
30mi
，进样分析。
21拉贝洛尔的GITC衍生化
f23不同结构的药物衍生化策略
胺基类手性药物：运用异硫氰酸酯（ITC）、异氰酸酯（IC）类、手性酰氯、磺酰氯类试剂，将其衍生化为酰胺、氨基甲酸酯、脲、硫脲和磺酰胺。
羧基类手性药物：运用手性胺类衍生化试剂，将其衍生化为酯和酰胺。
醇类手性药物：运用手性酰氯、磺酰氯类试剂，将其衍生化成酯。
烯类手性药物：衍生化成水性铂复合物。24手性固定相法（CSP）
f原理：将手性试剂化学键合到固定相上与药物对映体反应形成暂时的非对映体对复合物，这种固定相称作CSP。
在CSP表面所形成的非对映体对，可根据其稳定常数不同而获r