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细胞工程复习题第一章:绪论1细胞工程是指按照一定的设计方案,通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作,获得重构的细胞、组织、器官以及个体,创造优良品种和产品的综合性生物工程。广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术。
狭义的细胞工程则是指细胞融合和细胞培养技术。2细胞培养(cellculture)和组织培养(tissueculture)都属于体外培养(i
vitroculture),是指生物细胞和组织在离体条件下的生长和增殖。是细胞工程的最基本技术。3动物细胞工程发展史1、细胞融合现象的发现2、动物细胞培养技术的建立,1907年,Harriso
首先培养了蛙胚神经管区细胞,并观察到从中长出的轴突细胞(神经纤维),他的工作被认为是动物细胞培养开始的标志;3细胞融合技术的建立和杂交瘤技术的诞生4、动物克隆技术的建立4动物细胞工程的应用1、动物细胞培养生产医药产品(单克隆抗体2、新品种培育3、试管动物与婴儿4、组织工程5、珍稀动物资源的保存与保护5将目的基因在器官或组织中进行特异性高表达的基因动物称为动物生物反应器第二章1动物细胞工程实验室的设置无菌操作室(接种室)功能:细胞筛选、接种、培养基无菌制备要求:密封、防尘、防霉规划:更衣间、缓冲间、操作间培养与观察室功能:细胞培养、观察要求:清洁,防尘规划:观察室,培养室制备室功能:培养基的初制备、提取工艺的操作、细胞培养的上游和下游技术操作要求:清洁,防尘清洗灭菌室功能:培养皿的清洗、灭菌和无菌纯水的制备要求:清洁、防尘储藏室功能:保存细胞、无菌培养基、常用液体以及消毒后的器皿等要求:清洁,防尘2细胞计数法是用血细胞计数板计数细胞悬液中的细胞数目,用以测定细胞增殖和调整细胞浓度的一种方法。细胞计数的原则:”S”型计数,遵循数上不数下数左不数右的原则。细胞生长曲线是观察细胞在一代生存期内的增生过程的重要指标,以培养时间(d)为横坐标、细胞密度为纵坐标所做出的曲线。
3细胞贴壁率又称接种存活率,用于观察贴壁附着生长细胞,主要反映细胞的生存能力,和部分底物材料的相容性。4细胞活力测定方法:MTT比色法、CCK8法5细胞培养活体染色方法:1)碱性活性染料:噻嗪类(次甲基蓝、甲苯胶蓝)、哑喷类(量焦油蓝、量焦油紫)、吖嗪类(中性红、詹纳斯绿)、三酚苯甲烷类(甲基紫、维克多利亚蓝)2)酸性活性染料台盼蓝、刚果红、吡咯蓝)6支原体污染的检测方法:相差显微镜观察、荧光染色法观察r
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