、抗氧化、酶抑制、调血脂、镇痛、镇咳祛痰等多种生物活性1722,被广泛应用于医药、保健及美容等行业。传统的总黄酮分离纯化方法有萃取法、柱层析法、铅盐沉淀法等。随着社会的发展,大孔树脂吸附法成为近年来的较新分离纯化方法,与传统方法相比,采用大孔树脂分离提纯甘草总黄酮具有吸附性好、效率高、再生简便、成本低、洗脱剂毒性小使用周期长等优点,被广泛用于天然产物的富集和分离24。王芸芸14等以膜通量为指标讨论了不同温度、压力、时间、浓度下膜通量的变化,确定了在06Mp,2530oC,提取液浓度在原液基础稀释3倍后,操作30mi
有较大膜通量。本试验拟研究大孔树脂分离纯化甘草总黄酮的动态吸附解吸条件,并进行工艺验证试验,综合确定较优工艺参数,为生产高纯度甘草总黄酮工业化生产提供试验参考。111材料与方法材料与仪器
材料:市售甘草、芦丁标准品、各型大孔树脂(DS401、D101、AB8、HPD100)、显色剂(5亚硝酸钠、10偏铝酸钠、4氢氧化钠)以及其他化学试剂。
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f仪器:T6新悦可见光分光光度计(北京普析);SHB3循环水多用真空泵(郑州杜甫仪器厂);SB1100水浴锅,(上海爱明仪器);RE-52CS型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);FA1604型电子天平上海箐海仪器有限公司;FZ102型粉碎机(上海洪纪仪器设备有限公司)。12实验方法
121标准曲线的绘制13。精密称取芦丁样品500mg,置50ml容量瓶中,加适量30乙醇置水浴锅上加热溶解,冷却后用30乙醇定容至刻度,摇匀。准确量取00、10、20、30、40ml上述溶液分别置于10ml容量瓶中,各加蒸馏水补充至50ml,然后加5亚硝酸钠溶液03ml摇匀,放置6mi
;加10硝酸铝溶液03ml摇匀,放置6mi
;再加4氢氧化钠溶液40ml,用蒸馏水定容至10ml摇匀,放置15mi
,以同法作空白对照;置比色皿中在波长510
m处测定吸光度。再以吸光度值A为纵坐标,芦丁含量C(mg1)为横坐标,绘制标准曲线见附表1所得回归曲ml线方程为Y0008X00001r209999。122供试液的制备及树脂预处理。(1)供试液的制备。将甘草粉碎,过40目筛。称取适量粉碎样,置于150ml烧瓶中,加80的乙醇,以固液比120(WVgml)温度80℃,时间每次2h,次数2次进行回流提取,提取液合并、过滤即得供试液。(2)树脂的预处理。参见潘见6等、李玉霞16的方法并根据实际情况有所改进。先用体积分数91乙醇浸泡,使树脂充分溶胀,再用体积分数为91乙醇,洗至流出液加适量蒸馏水无白色浑浊,用蒸馏水洗尽乙醇,加入4倍体积8(r