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。4264度搅拌12小时。427静置10小时(4度)。428用蒸馏水使之充分透析(约48小时),得包被原2。43包被抗原C的合成421取EDC50mg,用pH80的10mmoLLPBS液15mL使之充分溶解(Ⅰ液)。422取SL58mg,用双蒸水2mL溶液(Ⅱ液)。423取HSA100mg,溶于3mL10mmoLLPBS(PH80)液中(Ⅲ液)。424将Ⅱ液与Ⅲ液混合,在磁力搅拌下逐滴加入Ⅰ液(余下05mL)。425室温下避光搅拌1小时,逐滴加入余下的Ⅰ液。4264度搅拌12小时。427静置10小时(4度)。428用蒸馏水使之充分透析(约48小时),得包被原3。44抗原的筛选
将三种包被抗原分别稀释到05mgmL,再分别作1:5、1:10、1:20、1:40、1:80、1:160、1:320稀释,在NC膜上点样,37℃温箱中干燥后,直接浸泡于金标抗体溶液中,观察不同抗原点样点的显色情况。
包被抗原B的点样显色非常浅,肉眼几乎无法分辨,包被抗原A最高稀释倍数为1:20,而包被抗原C的最高稀释倍数可达到1:160,故选择包被抗原C用于试纸条的组装。5抗原包被各种溶液的筛选51抗原包被液和包被条件的选择
分别用A、B、C、D、E五种不同配方的包被液将包被抗原作120,1:40,1:80,1160,1320稀释,在NC膜上点样后37℃20mi
烘干,用封闭液封闭后,滴加3倍稀释的纯化后金标抗体,反应8mi
后,洗涤液洗涤,观察显色情况。511包被液和包被条件的选择
f判断标准:
+++表示着色很深,与背景反差很大;
++表示着色较深或着色很深但背景色也较深;

表示着色淡或着色较深但有背景色;

表示没有着色,或与背景色没有反差。
包被液筛选结果见表3。表3包被液筛选结果
包被液12014018011601320
A+++++++++++

B+++++
+--
C+++++++++
+-
D+++++--
E+++---
由表可知,包被液A在1160稀释后,NC膜上点样着色照样很深,而其他包被液在1160稀释后,颜色很淡或不显色,故选择包被液A作为实际用包被稀释液。
用包被液A将包被抗原作120,1:40,1:80,1160,1320稀释,在NC膜上点样后分别37℃20mi
烘干和室温(20~25℃)30mi
自然干燥,其他条件不变,观察显色情况。包被条件筛选结果见表4。
表4包被条件筛选结果
包被液A37℃10mi
室温(20~25℃)
120++++++
140++++++
180+++++
1160++++
1320--
30mi

由表可知,点样后,包被液在37℃20mi
烘干和室温(20~25℃)30mi
自然干燥的不同包被条件差异不显著。为缩短试验过程,包r
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