沉现象；而加入抗体蛋白量达到或超过稳定胶体金的最小蛋白用量的6～10管保持红色不变。其中含抗体蛋白量最低的6号试管即含稳定1mL胶体金所需的最小蛋白用量。在此基础上再增加10～20％即为待标记抗体蛋白的实际用量，即稳定胶体金的实际蛋白用量为每1mL胶体金溶液中添加36g抗体蛋白。33胶体金标记抗体蛋白具体步骤33101moLLK2CO3调节胶体金溶液pH90。332将10mL胶体金溶液中加入50mL烧杯中，电磁搅拌器250rpm搅拌，逐滴加入1mL含036mg抗体蛋白的蛋白溶液。333逐滴加入5mL5％BSA，持续搅拌15mi
。
f34金标抗体的纯化（超速离心法步骤）341金标抗体溶液常温低速（1500rpm）离心20mi
，弃去由凝聚的金颗粒形成的沉淀。红色上清溶液4℃，11000rpm离心40mi
。342溶液分为三层，透明上清，管底可流动的暗红色沉淀及管底壁上黑色致密的金颗粒层。将可流动的暗红色沉淀转移到另外一个离心管中，用含1％BSA的005moLLPB混悬至原量。343平衡过夜，同上重复离心2次。344最后用2％BSA的001moLLPB（含002NaN3）将沉淀混悬为原体积的140，4℃保存。35金标抗体的质量鉴定
将羊抗鼠二抗点样于NC膜上，直接与金标Sterp单抗作用，可见有明显的粉红色斑点，表明金标抗体有活性。4包被抗原的合成与筛选
用于胶体金免疫层析试验的抗原和抗体必须有足够的敏感行、特异性和反应结合位点，能够和膜材料结合并与待测样品发生特异性反应。本实验中共合成了3种包被抗原，在ELISA反应中都能和单抗发生特异性反应，但将3种抗原包被到NC膜上后，只有包被抗原A能与胶体金标记的单抗发生良好的显色反应。这可能涉及到不同方法合成的包被抗原和NC膜的结合能力不同，同金标抗体的特异性结合反应也有差异，最后导致显色结果的不同。
用不同方法共合成了三种包被抗原：包被抗原A，包被抗原B和包被抗原C。41包被抗原A的合成411用05mL01mmoLLpH68的PBS稀释GA至浓度015mmoLL41210mgSL溶于05mLGA溶液中，413取BSA60mg用45mL双蒸水溶解。414将溶液（2）逐滴加入到溶液（3）中。室温下搅拌反应24小时。415用002M的PBS透析三天，每8小时换一次液。得包被原1。42包被抗原B的合成421取EDC50mg，用pH80的10mmoLLPBS液15mL使之充分溶解（Ⅰ液）。422取SL58mg，用双蒸水2mL溶液（Ⅱ液）。
f423取OVA48mg，溶于3mL10mmoLLPBS（PH80）液中（Ⅲ液）。424将Ⅱ液与Ⅲ液混合，在磁力搅拌下逐滴加入Ⅰ液（余下05mL）。425室温下避光搅拌1小时，逐滴加入余下的Ⅰ液r