集4次，离心去脂肪层和细胞层后，用硫酸铵纯化后分装冻存。腹水单抗的制备给BaLbc小鼠腹腔注射灭菌液体石蜡10mL只7～14天后同途径接种经克隆化培养后的杂交瘤细胞05mL1×104～2×104个经10天左右抽取腹水离心去除油脂和沉淀后即为小鼠腹水单抗。单抗效价测定将腹水或细胞上清液倍比稀释后按间接ELISA操作流程进行测定。主要操作如下：用包被缓冲液将包被用抗原OVAStrep稀释至适当的工作浓度每微孔加100μL，4℃过夜弃去孔内的液体。每孔加封闭液200μL，37℃水浴保持2小时后用洗涤缓冲液洗3次，将腹水或细胞上清倍比稀释后按顺序加入，每孔100μL每块板同时设空白对照、阴性对照和阳性对照各2孔。37℃水浴1小时，每孔加适当浓度的酶标二抗100uL，置37℃水浴1小时。每孔加新鲜配置的TMB底物液100μL，37℃水浴10～30分钟。每孔加终止液50μL。
f以待测孔光密度值OD值大于或等于阴性对照孔的21倍判为阳性。以判为阳性的最高稀释倍数为效价判定终点效价。重复3次计算平均值。
交叉反应试验将Strep和其结构类似物链霉素、硫酸链霉素、双氢链霉素、偶联载体BSA、OVA倍比稀释，每个浓度分别取50μL与50μL工作浓度的腹水在37℃水浴反应1小时，再加入到包被封闭好的酶标板微孔内反应1小时。然后按间接ELISA操作流程加单抗及HRP羊抗鼠IgG测定OD450值并计算交叉反应率，即YSZ倍100，其中S表示链霉素与50抗体结合时的浓度，Z表示类似物与50抗体结合时的浓度。
对链霉素的检测灵敏度测定：方法同交叉反应试验将不同浓度（0ppb100ppb）的链霉素作为标准品代替类似物进行试验最后450
m测定OD值并计算抑制率NPN值N为零标准品OD值P为其它标准品OD值。用抑制率作纵坐标标准品浓度的对数值作横坐标绘制标准曲线。测定10个零标准管求出光密度值的平均数X，再减去2倍标准差，从标准曲线上查出对应于光密度值为X2SD的浓度，即为灵敏度。3胶体金标记抗体蛋白
胶体金标记蛋白实质上是抗体蛋白等生物大分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面带负电荷，与蛋白质分子的正电荷之间靠静电力相互吸引，达到范德华引力范围内即形成牢固的结合。胶体金颗粒的粗糙表面也是利于形成吸附的重要条件。由于结合过程主要是物理吸附作用，并不影响蛋白质的生物活性。
由于盐类成分能影响金颗粒对蛋白质的吸附，并可使金颗粒聚沉，故标记前应先用低离子浓度的水透析，以除去多余的盐。胶体金对蛋白质的吸附r