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把抽吸臂向左侧推。B把流式管放置到SIT上,确保试管竖直,并用力向上推试管直到试管完个停止并完个就位。C把抽吸臂放置到试管下的中心位置。抽吸臂上有3个传感器引脚。试管底部应定位在这些引脚的中心位置内。
f2调节FSC和SSC电压以正确显示细胞的散射光特征。3必要时,点击阈值图标并对FSC阈值进行调节。4调节P1门仅围绕目的细胞群体。5调节好后,点击RecordData记录数据以记录数据。6获取停止,取出试管。
建立全局工作表
1如果用户参数中启用了Defaultglobalworksheet默认个局工作表默认选项,则全局工作表已经存在。展开全局工作表文件夹来定位和重命名工作表。(注:如果Defaultglobalworksheet被禁用,则通过点击浏览器工具栏中的NewGlobalWorksheet新个局工作表按钮创建个局工作表。)2使用设计对话框定义参数标记并指定各个试管要记录的细胞颗粒数。标记会出现在点图轴上和所有的统计结果图中。A选择Experime
t实验Experime
tLayout实验布局。B在Labels标签选项卡中,为试管输入适当的标签。例如,在FITC域中输入CD3。使用Tab键移动到下一个域。3在该全局工作表中,创建用预览数据的点图。例如创建PerCPCy55对SSCFITC对APCFITC对PEFITC对PECy7和FITC对APCCy7点图。
设门
通过设门的方法可以定义细胞亚群的区域。如:PBMC样本是混合细胞群,如果想单独分析淋巴球细胞,可根据FSC或细胞大小,在FSC,SSC的散点图中设门,其数据结果只
f反映淋巴细胞亚群的荧光特性。
关机
1选择Cytometer细胞仪FluidicsShutdow
液流关闭,并遵循所有的提示。2关闭细胞仪电源。3退出BDFACSDiva软件。
fC6简要操作流程
开机
1打开电脑,上样处放置一管双蒸水2打开C6仪器,其自动执行“startup”,时间约5mi
,期间禁止开盖3当软件显示仪器状态为“CytometerCo
ecteda
dready”并亮绿灯时,则可以上样4(推荐用质控微球上机,FL1H和FL2H直方图中必须有八个峰,FL3H中必须有68个峰,即仪器分辨率CV值满足标准)
采集样品
1样品震荡混匀后置于上样二档处2设置流速,采样数目或时间或体积3点击“DotPlot”或“Histogram”或“De
sityPlot”,选择需要的图形4点击坐标轴参数,从下拉菜单中选择需要的参数(如:“FL1A”“FSCA”)5点击“PlotSpec”,选择“li
ear”或者“log”,设置坐标轴显示范围6右击坐标轴参数,选择“Re
ameParameters”,进行坐标轴重命名7选择“Display”中的“Eve
tsDisplaySetti
gs”,选择显示的细胞数8选择样品位置,点击“ru
”,进行采样9取下样品r
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