常规HE染色
石蜡包埋的组织切片必须经过脱蜡水洗处理才能染色，让水溶性染料渗入组织中，含蜡的组
织切片无法进行任何染色。所以，在染色前必须用二甲苯或替换剂进行彻底脱蜡，经过乙醇
洗后，再用水洗。即石蜡组织切片→二甲苯→乙醇（无水乙醇，95，80）→水。人们通常
把这个过程叫做切片脱蜡至水。脱蜡至水是染色前的必须完成的基本步骤。一般脱蜡至水的
时间和步骤如下：
HE染色脱蜡至水步骤
步骤顺序
试剂
时间
1
二甲苯Ⅰ脱蜡
5mi

2
二甲苯Ⅱ脱蜡
5mi

3
二甲苯Ⅲ脱蜡
5mi

4
无水乙醇浸洗
1mi

5
95乙醇Ⅰ浸洗
1mi

6
95乙醇Ⅱ浸洗
1mi

7
80乙醇浸洗
1mi

8
自来水冲洗
35mi

冰冻切片和细胞涂片样品的染色不需要经过脱蜡至水步骤，水洗后直接用苏木精和伊红染色。
染色是利用染料的不同作用，使组织与染料以不同方式进行结合。常规染色是苏木精和伊红染色（HE）。特殊染色（specialstai
s）和组织化学（免役组织化学）染色是根据诊
断的需要对组织中的某些成分进行非常规的染色。HE染色用的苏木精是一种树木苏木的一种氧化产品，因为这种树非常罕见，多数氧化
苏木精是合成品。苏木精必须氧化成熟后才能使用。苏木精染液需要预先配制，放置几个月
自然氧化成熟。或购买成熟过的商品苏木精，也可在苏木精液中加一些成熟剂。苏木精本身对组织没有染色作用，需要“媒染剂”与组织连接，媒染剂是铁，铝，钨等
由这类正离子金属提供。矾也是苏木精常用的媒染剂，如Harris苏木精的配制以硫酸铝钾（钾明矾）或铵明矾作为媒染剂。不同媒染剂配制的苏木精染色强度不同。苏木精作为一种
基础染料对细胞核的核酸具有一定的亲和力。苏木精不是“退行性”就是“进行性”染色，退行性染色是把切片在染液内留一段时间，
然后从染液里出来用盐酸乙醇分化，去除过染的一部分。这种方法最适合大批量的染色。进行性染色切片在染液中染到自己想要得染色强度。如冰冻染色。冰冻染色比较简单，但染色
质量不如成批处理的好。
伊红是一种酸性染料，和细胞的胞浆成分具有亲合力。有各种合成的伊红可共使用，它们的颜色各异，但作用都一样。在实验室中伊红比苏木精更稳定，伊红很少发生染色问题。
唯一可以见到的问题是过染（overstai
i
g），尤其是脱钙组织。苏木精液配制
Harris苏木精液
苏木精
1g
无水酒精
10ml
硫酸铝钾或硫酸铝铵
20g
蒸馏水
200ml
先将苏木精溶于酒精，再将矾放进蒸馏水中，把苏木
f或改良明矾苏木精液Mayer苏木精明矾液
精液与矾液混合后r