化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。
实例:用鸡血细胞液粗提取DNA并鉴定
步骤
操作
图示
1、提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液(已在课前配好)510mL,注入到50ml烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20mL,同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌5mi
,然后,用放有纱布的漏斗将血细胞过滤至1000mL的烧杯中,取其滤液,滤液中含有核DNA和其它杂质。
1
f2、溶解细胞核内的DNA
3、析出含DNA的粘稠物
将物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液40mL加入到滤液中,并作玻璃棒沿一个方向搅拌1mi
,使其混合均匀,这时DNA在溶液中充分溶解,其它一些杂质析出,过滤取其滤液。
沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现。继续加入蒸馏水,溶液中出现的黏稠物会越来越多。当黏稠物不再增加时停止加入蒸馏水。
4、滤取含
用放多层纱布的漏斗,过滤溶液至1000mL的烧杯中。
DNA的粘取纱布上的黏稠物。
稠物
5、将DNA的粘稠物再溶解
6、过滤含DNA的氯化钠溶液
取一个50mL烧杯,向烧杯内注入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液20mL。用钝头镊子将纱布上的黏稠物夹至NaCl溶液中,用玻璃棒沿一个方向不停地搅拌3mi
,使黏稠物尽可能多地溶解于溶液中。
取一个100mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤以上溶液。取其滤液(DNA溶于滤液中)。
7、提取含杂质较少的DNA
8、DNA的鉴定
在上述滤过的溶液中,加入冷却的、体积分数为95%的酒精溶液50mL(加入时动作要慢),并作用玻璃棒沿一个方向搅拌,溶液中会出现含杂质较少的丝状物。当玻璃棒上出现丝状物缠绕时,继续慢慢搅拌,至不再增加时,用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸取上面的水分。
取两支20mL的试管,各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5mi
,等试管冷却后,观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化。
三、操作提示1、以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠,防止血液凝固。2、加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。
加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。3、二苯胺试剂要现配现用,否则会影响鉴定的效果。
四、课题成果评价1、是否提取出了DNA
观察你提取的DNA颜色,如果不是白色丝状r