多个常见基因测序技术优缺点及应用公布时间0719起源毕业论文网
伴随人类基因组计划完成人类对本身遗传信息了解和掌握有了前所未有进步。与此同时分子水平基因检测技术平台不停发展和完善使得基因检测技术得到了迅猛发展基因检测效率不停提升。从最初第一代以Sa
ger测序为代表直接检测技术和以连锁分析为代表间接测序技术到年以Illumi
a企业Solexa技术和ABI企业SOLiD技术为标志新一代测序
extge
eratio
seque
ci
gNGS相继出现测序效率显著提升时间显著缩短费用显著降低基因检测手段有了革命性改变。其技术正向着大规模、工业化方向发展极大地提升了基因检测检出率并扩展了疾病在基因水平研究范围。年3月约翰霍普金斯大学研究人员在《Scie
ce》杂志上发表了经过NGS外显子测序技术发觉了一个新遗传性胰腺癌致病基因PALB2标志着NGS测序技术成功应用于致病基因判定研究。同年《Nature》发表了采取NGS技术发觉罕见弗里曼谢尔登综合征MYH3致病基因突变和《NatGe
et》发表了遗传疾病米勒综合征致病基因。以后经过NGS技术与遗传相关致病基因不停被发觉NGS技术已成为里程碑式进步。年《Scie
ce》杂志将这一技术评选为当年“十大科学进展”。
近两年基因检测成为临床诊疗和科学研究热点得到了突飞猛进和日新月异发展越来越多临床和科研结果不停涌现出来。同时基因检测已经从单一遗传疾病专业范围扩展到复杂疾病和个体化应用愈加宽广领域其临床检测范围包含高危疾病新生儿筛查、遗传疾病诊疗和基因携带检测以及基因药品检测用于指导个体化用药剂量、选择和药品反应等很多方面研究。现在基因检测在临床诊疗和医学研究应用正越来越受到医生普遍重视和引发研究人员极大爱好。
本文介绍了多个DNA水平基因检测常见方法比较其优缺点和在临床诊疗和科学研究中应用对指导硕士和临床医生课外学习推进临床科研工作和提升科研教学水平有着指导意义。
1、第一代测序
f11Sa
ger测序采取是直接测序法。1977年FrederickSa
ger等发明了双脱氧链末端终止法这一技术随即成为最为常见基因测序技术。年Alla
Maxam和WalterGibert发明了Sa
ger测序法并在以后10年里成为基因检测金标准。其基础原理即双脱氧核苷三磷酸dideoxyribo
ucleosidetriphosphateddNTP缺乏PCR延伸所需3OH所以每当DNA链加入分子ddNTP延伸便终止。每一次DNA测序是由4个独立反应组成将模板、引物和4种含有不一样放射性同位素标识核苷酸ddNTP分别与DNA聚合酶混合形成长短不r