细菌的芽孢染色法和鞭毛染色法本文由翼知特别奉献
一、实验目的1、学习并掌握芽孢染色方法。2、初步了解芽孢杆菌的形态特征。3、学习并初步掌握鞭毛染色法，观察细菌鞭毛的形态特征。二、实验原理1芽孢染色法原理
芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理，用不同染料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。芽孢壁厚、透性低，着色、脱色均较困难，因此，当先用一弱碱性染料，如孔雀绿（malachitegree
）或碱性品红（basicfuchsi
）在加热条件下进行染色时，此染料不仅可以进入菌体，而且也可以进入芽孢，进入菌体的染料可经水洗脱色，而进入芽孢的染料则难以透出，若再用复染液（如番红液）或衬托溶液（如黑色素溶液）处理，则菌体和芽孢易于区分。2鞭毛染色法的原理
鞭毛是细菌的运动“器官”，一般细菌的鞭毛都非常纤细，其直径为001002μm，在普通光学显微镜的分辨力限度以外，故需要用特殊的鞭毛染色法，才能看到。
鞭毛染色是借媒染剂和染色剂的沉淀作用，使染料堆积在鞭毛上，以加粗鞭毛的直径，同时使鞭毛着色，在普通光学显微镜下能够
f看到。鞭毛染色方法很多，本实验主要介绍硝酸银染色法。三、实验器材1仪器：显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、接种环、载玻片、酒精灯等。2染色液：芽孢染色液：孔雀绿水溶液，沙黄水溶液鞭毛染色液：硝酸银鞭毛染色液A液，B液3菌种：枯草芽孢杆菌（芽孢染色用）、变形杆菌（鞭毛染色用）四、实验内容与步骤1、细菌芽孢染色（1）将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌，作涂片、干燥、固定。（2）滴加35滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。（3）用木夹夹住载玻片在火焰上加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约45分钟。这一步也可不加热，改用饱和的孔雀绿水溶液（约76％）染10分钟。（4）倾去染液，待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为止。（5）用沙黄水溶液复染23分钟，水洗。（6）待干燥后，置油镜观察，芽孢呈绿色，菌体呈红色。2、鞭毛染色（1）菌种的准备要求用活跃生长期菌种作为鞭毛染色的观察。
f（2）载玻片的准备将载玻片在含适量洗义粉的水中煮沸约20mi
取出用清水充分洗净，沥干水后备用，（也可置95乙醇中，用时取出在火焰上烧去酒精及可能残留的油迹。（3）制片在载玻片的一端滴一滴蒸馏水，用接种环挑取少许备用的菌苔，最好从菌落的边缘取菌苔，注意不r