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平板形成对照组,且每个平板所用的样液不超过0.1毫升。统计实验结果时注意选取菌落数介于30~300个之间的平板进行计数,且重复组结果要有相近性。

微生物的筛选和计数重要程度:★★☆☆☆
一、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.分离原理:土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶,这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。2.统计菌落数目:统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。3.实验流程:土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察→细菌的计数。
二、分解纤维素的微生物的分离1.纤维素酶
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f1组成:纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。2作用纤维素——→纤维二糖——→葡萄糖C酶
x
C1酶
葡萄糖苷酶
2.纤维素分解菌的筛选1原理纤维素分解菌↓
刚果红纤维素酶→红色复合物——→红色消失,出现透明圈纤维素
2筛选方法:刚果红染色法,即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。3培养基:以纤维素为唯一碳源的选择培养基。4实验流程土壤取样:富含纤维素的环境↓选择培养:用选择培养基培养,以增加纤维素分解菌的浓度↓梯度稀释:制备系列稀释液↓涂布平板:将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上↓挑选产生透明圈的菌落
1.筛选菌株的原则是:人为提供有利于目的菌株生长的条件包括营养、温度、pH等,同时抑制或阻止其他微生物的生长。
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f2.探究菌株筛选原理的不同点土壤中分解尿素的细菌①选择培养基的成分:尿素作为唯一的氮源②鉴定方法:在培养基中加入酚红说明细菌能分解尿素实验结果的可信度。4.怎样设置证明培养基未被污染的对照?用空白培养基作对照。5.怎样设置证明选择培养基选择作用的对照?用牛肉膏蛋白胨培养基接种等量同种菌液作对照。易错警示1为了使结果接近真实值,应设置三个或三个以上的平板,计算出菌落平均数。2计算时明显偏离实际值本组实验其他平板计数值的要舍弃掉后求平均值。3对照实验的设计首先要明确设计的目的,分析出实验的自变量之后才能准确设计。统计菌落数目的方法1显微镜直接计数法①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。②方法:用计数板计数。③缺点:不能区分死菌与活菌。2间接计数法活菌计数法①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀r
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