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中溶解度最小,用蒸馏水将NaCl溶液物质的量浓度调至014molL,可使DNA析出,A错误;DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液的溶解度不同,DNA在物质的量浓度为2molL的NaCl溶液中的溶解度较大,调节NaCl溶液的物质的量浓度至2molL,
f过滤可除去不溶于其中的杂质,此外,依据酶的专一性,直接加入木瓜蛋白酶也可水解蛋白质,去除部分
杂质,B正确;在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺试剂呈蓝色,C错误;如果实验材料是植物细胞,需要先
用洗涤剂溶解细胞膜,D错误。
【变式训练】多聚酶链式反应PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历30多次下述循环:95℃条
件下使模板DNA变性、解链→55℃条件下复性引物与DNA模板链结合→72℃条件下引物链延伸形成新
的脱氧核苷酸链。下列有关PCR过程的叙述,不正确的是
A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的
C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4种核糖核苷酸
D.PCR与细胞内DNA复制相比,其所需要酶的最适温度较高
【答案】C
【解析】PCR一般要经历30多次循环,每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。从第二轮循环开始,上
一次循环的产物也作为模板参与反应,并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合,进行DNA的延
伸。DNA变性90~95℃:双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA。复性55~65℃:系统
温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。延伸70~75℃:在TaqDNA聚合酶在72℃左右活性
最高的作用下,以dNTP三磷酸脱氧核糖核苷酸的缩写为原料,从引物的5′端向3′端延伸,合成与模
板链互补的DNA链。
三、血红蛋白的提取和分离
【知识点讲解】
1.方法及原理
1常用方法
方法
原理
凝胶色谱法
根据相对分子质量的大小分离蛋白质
电泳法
各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同
(2)凝胶色谱法分离蛋白质的原理
项目
相对分子质量大的蛋白质相对分子质量小的蛋白质
凝胶内部
不能进入
能进入
经过路程
较短
较长
洗脱次序
先流出
后流出
2提取和分离过程
(1)样品处理:红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析
(2)粗分离:用透析法除去血红蛋白溶液中相对分子质量较小的杂质
f(3)纯化:用凝胶色谱法分离相对分子质量不同的蛋白质(4)纯度鉴定:一般用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳方法来测定蛋白质的纯度【方法点拨】r
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