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选修1专题5DNA和蛋白质技术复习(教案)
复习要点
1DNA的粗提取与鉴定
2PCR技术
3血红蛋白的提取和分离
复习过程
一、DNA的粗提取与鉴定
【知识点讲解】
1实验原理1DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
溶解规律
2molLNaCl溶液014molLNaCl溶液
DNA
溶解
析出
NaCl溶液物质的量浓度从2蛋白质molL逐渐降低的过程中,部分发生盐析沉淀溶解
溶解度逐渐增大2DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,利用这一原理可将DNA与蛋白质进一步分离。
3DNA与二苯胺沸水浴加热,呈蓝色。2操作流程(1)材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织(2)破碎细胞以鸡血为例:鸡血细胞→加蒸馏水→用玻璃棒搅拌→用纱布过滤→收集滤液
(3)去除杂质:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质(4)DNA的析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为95的酒精溶液(5)DNA的鉴定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂,混合均匀后将试管置于沸水中加热5mi
,溶液变成蓝色
【例题讲解】如图为菜花DNA的粗提取与鉴定的实验流程图。据图回答下列问题:
f(1)选择菜花作为提取DNA的实验材料的原因是______________。(2)研磨前,向研钵中加入石英砂的目的是___,加入的物质a是_______。(3)研磨液过滤后,应向滤液中加入2molL的NaCl溶液,目的是______;也可以向滤液中加入嫩肉粉,目的是__________。(4)鉴定DNA所用的化学试剂为________,鉴定实验中,A、B两支试管属于对照组的是____________________,对照组试管中加入的物质有______。【答案】(1)菜花中的DNA含量相对较高(2)使研磨充分洗涤剂和食盐(3)溶解DNA,析出不溶的杂质分解蛋白质(4)二苯胺ANaCL溶液和二苯胺试剂【解析】(1)原则上含DNA的生物材料都可以作为提取DNA的实验材料,只是选用DNA含量相对较高的生物组织,实验成功的可能性更大。菜花中DNA含量相对较高,可以作为提取DNA的材料。(2)向研钵中加入石英砂是为了使研磨更充分。在本实验中同时向研钵中加入一定量的洗涤剂和食盐,洗涤剂可以瓦解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。(3)在含有DNA的滤液中,加入2molL的NaCL溶液,可以使DNA溶解、析出不溶的杂质;嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能分解滤液中的蛋白质。(4)鉴定DNA的原理是在沸水浴条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色,因此鉴定DNA所用的化学试剂为二苯胺。Br
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