１。
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请回答：
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f（１）进行过程①时，需用
酶切开载体以插入let7基因。载体应用RNA聚合。
酶识别和结合的部位，以驱动let7基因转录，该部位称为（２）进行过程②时，需用
酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
（３）研究发现，let7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图２。据图分析，可从细胞提取进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，（RASmRNARAS蛋白）含量减少引起的。
可能是由于细胞中【答案】（10分）
（1）限制性核酸内切酶（或限制）（2）胰蛋白（3）RNA【解析】RAS蛋白
启动子
（1）过程①表示基因表达载体的构建，在该过程中需要用限制酶对载体进行切割以便于目的基因的插入（限制性核酸内切酶，简称限制酶，写其他的不得分）；启动子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶结合和识别的位点，RNA聚合酶结合到该位点，可驱动转录过程。（2）过程②表示动物细胞培养，培养过程中出现接触抑制后可以用胰蛋白酶处理，使之分散成单个的细胞，之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养。（3）判断目的基因是否在受体细胞中转录，可用分子杂交技术来进行，从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交。根据题中信息“肺组织细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达就增强，引发肺癌”导入let7基因后，肺癌细胞受到抑制，说明RAS基因表达减弱，导致细胞中的RAS蛋白质含量减少进而导致癌细胞受抑制。【试题点评】本题主要考查选修3中有关基因工程和细胞工程中的知识，涉及的知识点主要有表达载体的构建目的基因的检测动物细胞培养等。试题难度不大。
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