：剪一大块塑料薄膜铺在桌面上，将层析缸或大烧杯到置于塑料薄膜上，再把盛有约5mL展层溶液的小烧杯置于倒置的层析缸或大烧杯中，用塑料薄膜密封起来，平衡20mi
。（3）规划：带上手套，取宽约10cm、高约15cm的层析滤纸一张。在纸的下端距边缘2～3cm处轻轻用铅笔划一条平行于底边的直线A，在直线上做4个记号，记号之间间隔2cm，这就是原点的位置。另在距左边缘1cm处画一条平行于左边缘的直线B，在B线上
以A、B两线的交点为原点标明刻度（以厘米为单位），参见下图。图2实验装置示意图
（4）点样：用毛细管分别取10mL左右的氨基酸样品点在四个位置上。干后重复点样，

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同一位置上需点2～3次，2～3mL次，保证每点在纸上扩散的直径最大不超过3mm。其中3个是已知样，1个是待测样品。（5）层析：用针、线将滤纸缝成筒状，纸的两侧边缘不能接触且要保持平行，参见图11。向培养皿中加入扩展剂，使其液面高度达到1cm左右，将点好样的滤纸筒直立于培养皿中（点样的一端在下，扩展剂的液面在A线下约1cm），罩上大烧杯，仍用塑料薄膜密封。当扩展剂上升到A线时开始计时，每隔一定时间测定一下扩展剂上升的高度，填入表1中。当上升到15～18cm，取出滤纸，剪断连线，立即用铅笔描出溶剂前沿线，自然风干或用电吹风热风吹干。（6）显色：用喷雾器在通风厨中向滤纸上均匀喷上01茚三酮正丁醇溶液，然后置烘箱中烘烤5分钟100℃或用热风吹干即可显出各层析斑点。（7）计算各种氨基酸的Rf值，并判断混合样品中都有哪些氨基酸，各人将自己的实验结果贴在实验报告上，见表2。（8）以层析时间为横坐标，扩展剂上升高度为纵坐标画图，求出扩展剂上升到15cm时所需要的时间。

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【实验结果与数据处理】



表1扩展剂前沿上升速度X（mi
）0510152030406090…Y（cm）00815215375485597988815
表2各种氨基酸的Rf值
原点到层析斑点中心的距离原点到溶剂前沿的距离Rf判断待测氨基酸
【实验结论】
赖氨酸脯氨酸
亮氨酸
011
043
070
088
088
088
012
048
079
赖氨酸、脯氨酸、亮氨酸
待测氨基酸044088050
通过实验可以知道每种氨基酸的在扩展剂中的移动速率是不相同的，利用每种氨基
酸在纸上的位置不同可以计算出氨基酸的Rf值。和标准的Rf值对比，得出氨基酸种类。
据此由上表2可知，混合氨基酸是由赖氨酸、脯氨酸、亮氨酸组成。
【注意事项】⑴点样时要避免手指或唾液等污染滤纸r